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黑果枸杞是具有显著民族特色的沙漠药用植物,被收载于藏药经典著作《晶珠本草》。该植物中含有丰富的花色苷类化合物,是理想的天然色素开发对象。但目前对黑果枸杞中化学成分进行分离纯化与结构鉴定的研究很少,其物质基础尚不清楚,这己成为阻碍黑果枸杞深度开发的关键因素之一。花色苷是一种天然的水溶性色素,同时具有多种生物活性,正是人们所期待的功能性天然色素。高效液相色谱技术在植物花色苷的纯化制备中发挥着巨大的作用。目前,反相液相色谱几乎是唯一的花色苷液相色谱分离方法,该方法的分离选择性有限,严重影响花色苷的制备效率。因此,有必要开展花色苷液相色谱分离的新方法研究。本论文首次系统地研究了黑果枸杞的化学组成。首先,基于新型色谱固定相,发展了多种色谱模式下的花色苷分离方法,解决了黑果枸杞中花色苷异构体、花色苷/非花色苷的选择性分离问题。其次,利用多维液相色谱分离技术,完成了黑果枸杞中生物碱和酸/中性化学成分的高效制备,最后,对分离获得的单体化合物进行了生物活性的初探。针对常规反相固定相分离花色苷异构体的选择性不足问题,基于反相/强阴离子交换混合模式色谱固定相XCharge C8SAX,发展了一种花色苷顺反式异构体的混合模式色谱纯化分离方法。该方法改善了对花色苷异构体的分离选择性,成功从黑果枸杞中制备6个纯的花色苷类化合物,包括2对花色苷异构体和1个新花色苷。针对黑果枸杞中花色苷和生物碱分离选择性不足的问题,利用花色苷的亲水性结构特点,基于两性离子亲水色谱固定相Click XIon,开发了一种花色苷的亲水作用色谱分离方法,实现了黑果枸杞中难分离花色苷的纯化制备,分离获得4单体化合物,包括1个花色苷和3个新生物碱,均为黑果枸杞中首次分离。针对花色苷定性分析中的难点问题,通过研究花色苷对照品的色谱保留、光谱和质谱裂解规律,建立了一种花色苷的HPLC-DAD/QTOF-MS/MS快速表征方法。将该方法用于黑果枸杞花色苷的分离分析,共鉴定16个花色苷,其中7个为黑果枸杞中首次报道。此外,黑果枸杞中可能存在一些新花色苷。针对黑果枸杞中非花色苷化学成分的分离问题,采用优化的液相色谱纯化制备方法,分离获得7个酰胺生物碱、2个酚酸和1个黄酮醇苷,均为黑果枸杞中首次分离。实验结果表明,petunidin-3-cis-p-coumaroylrutinoside-5-glucoside具有很强的动态质量重置(DMR)响应信号。花色苷的空间结构和取代基对其生物活性可能具有重要影响。