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目的:HMGB1是一种高度保守的染色体结合蛋白,在多种肿瘤中高表达,并参与调控肿瘤的增殖和转移等生物学过程。本研究旨在明确HMGB1在胃癌细胞增殖和迁移中的作用,探究其发挥作用的潜在分子机制。方法:免疫组化实验检测HMGB1在胃癌组织和癌旁组织中的表达,western blot检测HMGB1在不同类型胃癌细胞和正常胃黏膜上皮细胞中的表达,核质分离检测HMGB1在胞质和胞核中的分布,ELISA检测HMGB1的释放。构建HMGB1过表达质粒和干扰质粒,转染胃癌细胞后,运用EdU和克隆形成实验检测细胞增殖情况,划痕和transwell实验检测细胞迁移情况,western blot检测周期相关蛋白、基质金属蛋白酶、上皮细胞间质化标志蛋白和受体RAGE、TLR2、TLR4的表达以及Akt-mTOR、ERK-CREB信号通路的活化。使用RAGE抑制剂FPS-ZM1和rhHMGB1单独或联合处理胃癌细胞后,western blot检测Akt-mTOR、ERK-CREB信号通路的活化;LY294002,雷帕霉素(Rapamycin)和U0126(Akt,mTOR和ERK的抑制剂)处理胃癌细胞,通过EdU、克隆形成、划痕和transwell实验检测细胞增殖和迁移情况。结果:HMGB1在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,但表达水平与临床患者信息无明显相关性,p>0.05。不同类型的胃癌细胞中HMGB1的表达和释放亦显著高于胃黏膜上皮细胞,尤以HGC-27细胞最为明显。转染HMGB1过表达质粒,上调胞内HMGB1水平,明显促进HGC-27细胞的增殖和迁移;上调周期蛋白(cyclin),PCNA,基质金属蛋白酶(MMP)和RAGE受体表达;促进上皮细胞间质化(EMT);增强Akt-mTOR及ERK-CREB信号通路的激活。转染HMGB1干扰质粒,下调胞内HMGB1表达,上述结果呈现出相反的变化。在HGC-27细胞中,RAGE抑制剂FPS-ZM1预处理HGC-27细胞,有效抑制了rhHMGB1诱导的Akt-mTOR及ERK-P90RSK信号通路磷酸化;mTOR和ERK抑制剂显著下调了rhHMGB1诱导的RAGE表达;Akt,mTOR和ERK的抑制剂明显减弱了rhHMGB1诱导的HGC-27细胞的增殖和迁移。结论:1、HMGB1在胃癌组织和胃癌细胞中高表达。2、HMGB1通过上调周期相关蛋白和基质金属蛋白酶的表达,增强上皮细胞间质化反应,促进HGC-27细胞增殖和迁移。3、HMGB1通过RAGE介导的Akt和ERK信号途径和RAGE-mTOR/ERK反馈环路调节胃癌细胞的增殖和迁移。