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目的：
比较GPC3、CD34及网状纤维染色在肝各结节增生性病变中的鉴别诊断作用，并探讨GPC3在HCC中作用机制与经典Wnt/β-catenin信号传导通路可能性关系。
方法：
应用免疫组织化学(Elivision法)对23例血清AFP阴性高分化肝细胞癌(W-HCC)、16例高级别异型增生性结节(H-DN)、13例低级别异型增生性结节(L-DN)和25例局灶性结节状增生(FNH)分别进行GPC3和CD34抗体标记，并每例做网状纤维特殊染色，分析在肝结节增生性病变中的鉴别诊断作用。并应用组织芯片技术对上述23例W-HCC和50例进展性肝细胞癌(A-HCC，包括;中分化肝细胞癌M-HCC和低分化肝细胞癌P-HCC各25例)分别进行GPC3、β-catenin和CyclinDl抗体标记，分析三者在HCC中表达的相关性和分别与临床病理参数的关系。
结果：
1.GPC3的阳性表达率在血清AFP阴性W-HCC和H-DN中分别为73.9％(17/23)和12.5％(2/16)，L-DN和FNH中无表达。GPC3在血清AFP阴性W-HCC中阳性表达率高于H-DN，组间表达具有显著性差异（P＜0.05）。GPC3在血清AFP阴性W-HCC中癌旁组织中表达率为8.7％(2/23)，癌与癌旁组织表达具有显著性差异(P＜0.05)。
2.CD34在血清AFP阴性W-HCC中表达模式有斑点状、裂隙状和环岛状，阳性表达率为60.9％(14/23)，阳性范围大多在25％-100％;在H-DN和L-DN中的阳性表达率分别为18.8％(3/16)和23.1％(3/13)，阳性范围大多在5％-25％;在FNH中的阳性表达率为0％(0/25)，组间表达具有显著性差异（P＜0.05）。CD34在血清AFP阴性W-HCC中的阳性表达率高于H-DN、L-DN、FNH，组间表达具有显著性差异（P＜0.05）。CD34在血清AFP阴性W-HCC中癌旁组织中表达率为26.1％(6/23)，癌与癌旁组织表达具有显著性差异（P＜0.05）。
3.网状纤维染色肝板＞3层细胞厚度阳性率在血清AFP阴性W-HCC和H-DN中分别为69.5％(16/23)和12.5％(2/16)，L-DN和FNH中无表达。网状纤维染色在血清AFP阴性W-HCC中的阳性表达率高于H-DN，组间表达具有显著性差异（P＜0.05)。网状纤维染色在血清AFP阴性W-HCC中癌旁组织中表达率为17.4％(4/23)，癌与癌旁组织表达具有显著性差异（P＜0.05）。
4.GPC3、CD34、网状纤维染色对血清AFP阴性W-HCC的检出率分别为73.9％、60.9％、69.5％;三指标联合的检出率分别为91.3％。
5.GPC3的阳性表达率在W-HCC、M-HCC、P-HCC中分别为73.9％(17/23)，88％(22/25)和96％(24/25)。GPC3在A-HCC中的阳性表达率92％(46/50)高于W-HCC的73.9％(17/23)，组间表达差异具有显著性（P＜0.05）。GPC3在73例HCC中癌组织和癌旁组织中表达率分别为86.3％(63/73)和6.8％(5/73)，组间表达差异具有显著性（P＜0.05）。
6.β-catenin的阳性表达率在W-HCC、M-HCC、P-HCC中分别为52.2％(12/23)、60％(15/25)和68％(17/25)。β-catenin在A-HCC中的阳性表达率64％(32/50)高于W-HCC的52.2％(12/23)，组间表达差异没有显著性(P＞0.05)。β-catenin在73例HCC中癌组织和癌旁组织中表达率分别为60.3％(44/73)和13.7％(10/73)，组间表达差异具有显著性（P＜0.05）。
7.CyclinDl的阳性表达率在W-HCC、M-HCC、P-HCC中分别为56.5％(13/23)、60％(15/25)和76％(19/25)。CyclinDl在A-HCC中的阳性表达率68％(34/50)高于W-HCC的56.5％(13/23)，组间表达差异没有显著性(P＞0.05)。CyclinDl在73例HCC中癌组织和癌旁组织中表达率分别为64.4％(47/73)和11％(8/73)，组间表达差异具有显著性（P＜0.05）。
8.GPC3蛋白和β-catenin蛋白的表达呈正相关(r=0.246，P＜0.05);β-catenin蛋白和CyclinDl蛋白的表达呈正相关(r=0.507，P＜0.01); GPC3蛋白和CyclinDl蛋白的表达呈正相关(r=0.286，P＜0.05)。
9.在HCC中，GPC3表达与肿瘤直径以及Edmondson-Steiner病理分级相关(P＜0.05);β-catenin、CyclinDl表达与各临床病理参数均不相关(P＞0.05)。
结论：
1.GPC3蛋白在早期血清AFP阴性W-HCC中高表达，H-DN、L-DN、FNH和癌旁肝脏组织中低表达或不表达，表现出GPC3良好的敏感性和特异性，特别与H-DN比较差异具有统计学意义，有望成为血清AFP阴性HCC的早期诊断及鉴别诊断的理想标志物。
2.GPC3、CD34和网状纤维染色在血清AFP阴性W-HCC鉴别诊断比较得:GPC3是一个较敏感及特异的标记物，其与CD34和网状纤维染色联合使用对鉴别血清AFP阴性W-HCC与H-DN、L-DN、FNH具有较高的应用价值。
3.GPC3、β-catenin和CyclinDl蛋白在HCC中高表达，提示其在HCC的发生、发展中可能起到重要作用。
4.GPC3、β-catenin和CyclinDl蛋白在HCC中表达三者间存在正相关性，推测GPC3蛋白在HCC中作用机制可能和经典Wnt/β-catenin信号传导通路有一定的关系。
5.GPC3蛋白在HCC中表达和Edmondson-Steiner病理分级相关，分化越差，其阳性表达率越高。除此，GPC3与肿瘤直径相关，说明GPC3除与肿瘤的发生发展有关外，可能还与肿瘤的转移、预后相关。