低渗透压对大鼠三叉神经节神经元ATP-激活电流的抑制作用

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本实验应用全细胞膜片钳技术,在大鼠三叉神经节神经元上探讨低渗透压对ATP-激活电流的调制作用。结果显示:(1)大部分受检细胞(80.90%)对外加ATP敏感,产生一具有浓度依赖性的内向电流,且该电流可以被P2X受体拮抗剂PPADS所阻断。(2)预加低渗溶液(220 mOsm,260 mOsm,300 mOsm),对IATP产生抑制作用,该抑制作用呈可逆性,渗透压依赖性和非电压依赖性。(3)在低渗透压(260 mOsm)环境下,ATP-激活电流的浓度反应曲线明显下移;阈值和最大反应浓度不变,EC50为1.19×10-4 M,与单独加ATP时的1.33×10-4 M基本一致;而最大反应浓度时的ATP 电流幅值减小了25.26±2.41%(n=6)。(4)低渗透压对IATP的抑制作用可被TRPV4(transient receptor potential vanilloid 4)受体激动剂4 ɑ-PDD(4 ɑ-phorbol 12,13-didecanoate)增强,并可被TRPV4受体非特异性阻断剂钌红(ruthemium red,RR)阻断。(5)在细胞外液中加入forskolin 或8-Br-cAMP预孵育,可以部分翻转低渗对ATP-激活电流的抑制作用,而H89预孵育则不影响低渗对IATP的影响。以上结果表明,低渗透压作用于TRPV4受体,可能通过直接抑制cAMP的生成而抑制P2X受体介导的电流,从而发挥对ATP激活电流的抑制作用。
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