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背景结核病(tuberclosis)是严重危害人类健康的慢性传染病,近年来疫情的回升严重威胁着世界各国人民的生命财产安全,已成为全球关注的重大公共卫生问题和社会问题。目前,我国结核病疫情也呈回升趋势,并且重症患者和难治性患者越来越多,呈现出高感染率、高患病率、高死亡率和高耐药率的特点。因此寻找灵敏、特异、高效、实用的结核病诊断方法是实验诊断领域研究的热点,也是结核病早期诊断、彻底治疗、有效预防和控制蔓延的关键。结核病是由结核分枝杆菌感染引起的,实验室分离和检测病原体及其代谢产物是结核病诊断的主要依据。常用的结核杆菌检测方法虽然各有优点,但都有一定的局限性,如容易受其它抗酸性分枝杆菌的干扰,检测灵敏度差、阳性率低、容易造成漏检。特别是培养法作为目前公认的诊断结核分枝杆菌的金标准,仍然存在敏感度低、所需时间过长、对疾病的早期诊断和治疗意义不大等不足。近年来,荧光定量PCR(FQ-PCR)结核杆菌核酸分子(TB-DNA)检测技术的建立为结核病的早期诊治和防控带来了希望。关于FQ-PCR在结核病诊断中的应用研究,目前主要集中在对确诊病人以上几种实验方法的对比方面,在对初次发病的患者的早期诊断及鉴别诊断方面研究较少,对于不同类型结核病的相应标本检测的有效性方面研究也不多,特别是缺乏大样本的临床应用评价。鉴于此,我们开展了本实验。目的完善FQ-PCR法对痰液、胸水、脑脊液和尿液等不同类型标本TB-DNA的检测方法,评价其对肺结核、结核性胸膜炎、结核性脑膜炎和泌尿系结核的早期诊断价值。方法随机选择初次就诊的可疑结核病患者为实验对象,分为肺结核组、结核性胸膜炎组、结核性脑膜炎组和泌尿系结核组,分别收集痰液、胸水、脑脊液和尿液标本,经规范处理后,用FQ-PCR试剂盒进行TB-DNA检测,得到Ct值(cycle threshold),以Ct<30并曲线为标准S形曲线的实验结果判为阳性。同时进行抗酸染色、细菌培养等实验室检查,结合临床诊疗过程和随访,确定所选病例的进展。按照各类结核病诊断标准对受试者做出最后诊断。将实验结果与最终诊断进行比对,做出FQ-PCR对各类结核病的早期诊断临床性能评价。结果肺结核组得到有效资料123例,痰液标本FQ-PCR扩增TB-DNA阳性66例,阴性57例；金标准判定为肺结核的93例,不是肺结核的30例。其中真阳性数为64,假阳性数为2,真阴性数为28,假阴性数为29。由此计算出该方法的临床灵敏度尚可,为68.8%,临床特异度较好,为93.3%,总正确度尚可,为74.8%。阳性预测值较好,达96.9%,而阴性预测值较差,仅49.1%。结核性胸膜炎组胸水标本FQ-PCR扩增TB-DNA,其临床灵敏度、临床特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为70.4%(38/54)、96.8%(31/32)、97.4%(38/39)、65.9%(31/47)。结核性脑膜炎组脑脊液标本FQ-PCR扩增TB-DNA,其临床灵敏度、临床特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为46.9%(31/66)、92.3%(12/13)、96.9%(31/32)、25.5%(12/47)。泌尿系结核组受检的78例疑似病人尿液标本,其临床灵敏度、临床特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为38.4%(20/52)、84.6%(22/26)、83.3%(20/24)、40.7%(22/54)。结论FQ-PCR法检测结核分枝杆菌对结核病的早期诊断具有较高临床价值。痰液和胸水对结核病的诊断特异性好,阳性预测值高,临床灵敏度尚可,但阴性预测值较低,容易出现漏诊。脑脊液和尿液标本对相应结核病的诊断有较好的排除性能,但确诊性能不够好。