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目的:
糖尿病足是糖尿病患者致残致死的一个重要原因。蜂蜜是一种较为古老的皮肤创面敷剂,大量研究表明蜂蜜可以促进多种创面愈合,具体机制尚不清楚。皮肤溃疡中上皮及新生血管的生成是皮肤溃疡愈合的重要过程,在糖尿病皮肤溃疡的病理愈合过程中,创面局部血管内皮生长因子的活性下降,表皮生长因子表现为受抑制状态。本课题旨在于探讨局部应用蜂蜜在糖尿病创面愈合中的作用,并进一步阐述其可能的作用机理,为糖尿病创面的临床护理提供依据。
方法:
1.将造模的63只大鼠随机分为三组:对照组、糖尿病组、蜂蜜组,四氧嘧啶诱导糖尿病组、蜂蜜组大鼠发生糖尿病,大鼠背部制造面积为2.56cm2的全皮层皮肤创面。对照组与糖尿病组大鼠创面外涂抹凡士林;蜂蜜组大鼠创面外涂抹蜂蜜。
2.观察三组大鼠的创面愈合时间和创面面积的变化。
3.分别于治疗后第7天、14天显微镜下观察创面组织形态的变化。
4.观察创面成纤维细胞数量、表皮生长因子及血管内皮生长因子表达的情况。所有数据进行统计学分析。
结果:
1.对照组创面愈合时间与蜂蜜组相比缩短,蜂蜜组创面愈合时间与糖尿病组相比缩短(P<0.01);重复测量方差分析结果显示:三组在处理主效应上差异有统计学意义(P<0.01),即不考虑时间因素,处理方法不同的大鼠创面愈合面积有差异,时间主效应有统计学意义(P<0.01),即不考虑处理因素,三组创面愈合面积随时间的变化有变化。
2.组织形态学观察:对照组镜下可见成纤维细胞,胶原排列整齐、规则,真皮层能见毛细血管。糖尿病组镜下可见典型的溃疡组织结构排列,细胞排列较为混乱,肉芽组织排列疏松,血管增生减少。蜂蜜组可见溃疡表面少量坏死组织,与糖尿病组相比,炎症细胞明显减少,坏死组织脱落较早,上皮细胞出现时间较早,毛细血管增生多。
3.各时间点对照组的血管内皮生长因子阳性表达高于蜂蜜组(P<0.05);第7天,蜂蜜组创面组织血管内皮生长因子阳性表达高于糖尿病组(P<0.05);第14天,蜂蜜组与糖尿病组之间血管内皮生长因子阳性表达无明显差异(P>0.05)。
4.各时间点糖尿病组创面成纤维细胞数量低于蜂蜜组(P<0.01),第7天对照组与蜂蜜组创面成纤维细胞数量无统计学差异(P>0.05),第14天对照组创面成纤维细胞数量高于蜂蜜组(P<0.01)。
5.各时间点糖尿病组表皮生长因子的表达均低于蜂蜜组(P<0.01)。第7天对照组和蜂蜜组表皮生长因子表达无统计学差异(P>0.05);第14天对照组表皮生长因子阳性表达高于蜂蜜组(P<0.05)。
结论:
1.四氧嘧啶(120mg/Kg)单次腹腔注射,可建立稳定的糖尿病大鼠模型,控制血糖水平在12~16mmol/L对于模型的稳定有重要作用;这种制作模型的方法操作简单,可重复性强,可用来进行进一步实验。
2.糖尿病大鼠皮肤创面局部应用蜂蜜治疗,可以缩短创面愈合的时间,改善创面情况,促进成纤维细胞增殖。
3.糖尿病大鼠皮肤创面局部应用蜂蜜治疗,可增加创面组织中早期血管内皮生长因子的表达,血管内皮生长因子在促进创面组织早期血管形成及血管内皮细胞分裂增殖方面有重要作用。
4.糖尿病大鼠皮肤创面局部应用蜂蜜治疗,可增加创面组织中表皮生长因子的表达。表皮生长因子在促进成纤维细胞增殖、增加创面组织中胶原合成方面有着重要意义,提示蜂蜜的治疗作用与蜂蜜促进表皮生长因子的表达有关。