酸枣仁汤(Suanzaoren Dococton,SD)一方源于东汉大医家张仲景所著的《金匮要略》卷上,名为“酸枣汤”,《医门法律》卷六始名“酸枣仁汤”。原方由酸枣仁、茯苓、知母、川芎、甘草等五味中药组成,功善补血调肝、养心安神、清热除烦,主治肝血不足、虚热内扰所致之“虚劳虚烦不得眠”。临床用于治疗精神神经系统和心血管系统疾病,对顽固性失眠有显著疗效。 中药酸枣仁为复方酸枣仁汤中的君药,是鼠李科植物酸枣Ziziphus jujubaMill.var.spinosa Hu ex H.F.chou的干燥成熟果仁。味甘,性平。能补肝、宁心、敛汗、生津。主治虚烦不眠,惊悸梦多,体虚多汗、津伤口渴等症。 本论文采用超临界二氧化碳萃取技术和水蒸气蒸馏法提取供试样品,对复方酸枣仁汤和酸枣仁(炒制)、酸枣仁(生品)、川芎等单味药中的脂肪油类成分和挥发油类成分进行了GC-MS分析研究。通过与标准图库对照,共鉴定了37个成分,分别为2,4-癸二烯醛、棕榈酸甲酯、棕榈酸、棕榈酸乙酯、9,12-十八碳二烯酸、十八碳烷酸甲酯、9-十八碳烯酸、9-十八碳烯酸甲酯、十八烷酸乙酯、3-丁叉基夫内酯、3-丁基苯酞、花生酸乙酯、乙基亚油酸、十七烷酸乙酯等。其中2,4-癸二烯醛、棕榈酸甲酯、棕榈酸乙酯为首次从酸枣仁油中发现;4-甲基-3-环戊烯-1醇、安息油、4-甲基苯酚等八个化合物为首次从川芎油中发现。通过进一步的分析,结果表明,复方超临界二氧化碳萃取样品中棕榈酸、9,12-十八碳二烯酸的相对含量较单味药低,但复方样品中检测出乙基亚油酸、十七烷酸乙酯等成分,而单味药中未检测出这些成分,从而为探讨复方酸枣仁汤采用超临界二氧化碳萃取时,各药中化学成分的影响提供了理论依据;酸枣仁炮制前后的超临界萃取样品中2,4-癸二烯醛和棕榈酸乙酯的相对含量几乎没有变化,但炒制后棕榈酸和9,12-十八碳二烯酸的相对含量增高,而9-十八碳烯酸的相对含量明显降低。这对于探讨复方酸枣仁汤以炒制酸枣仁入药的物质基础具有一定意义。 酸枣仁的药理研究表明,酸枣仁养血安神作用的有效部位为脂肪油和皂苷类成分。本论文采用GC色谱法建立了中药酸枣仁脂肪油部位的指纹图谱,在不同批次样品中共检测到28个色谱峰,标定了12个共有指纹峰,其中t_R为58.945min的色谱峰与油酸甲酯对照品色谱峰一致;采用HPLC-ELSD色谱法对中药酸枣仁皂苷有效部位进行了指纹图谱的研究,在11批样品中共检测出48个色谱峰,标定了巧个共有指纹峰,其中保留时间为29.548min的色谱峰与酸枣仁皂营A对照品色谱峰一致。由此建立的指纹图谱客项技术参数均符合《中药注射剂指纹图谱技术要求(暂行)》的相关规定,方法重现性和稳定性好,从而为中药酸枣仁的质量控制提供了充分的科学依据。 在酸枣仁皂昔部位指纹图谱研究的基础上,对酸枣仁、知母、甘草等单味药有效部位和复方酸枣仁汤有效部位中的皂昔类成分进行了HPLC指纹图谱的比较研究,判断了复方皂昔类化学成分的归属。复方指纹图谱中编号为1、4、5、7、17、19的色谱峰在酸枣仁指纹图谱中相应保留时间处有相同的色谱峰;编号为3、6、8、9、14、18的色谱峰与知母中相应色谱峰一致;编号为2、13、15、18、22、23、24、25的色谱峰则来源于甘草。此外,在三个单味药中均检测到复方中编号为20、27的色谱峰。从而为探讨复方各中药共提后,其有效成分是否发生变化提供了一定的依据。 中药的物质基础是通过体内血液循环而发挥作用的。为了探讨复方酸枣仁汤及其君药酸枣仁的有效成分在血液中的分布情况,对两者的皂昔提取物和复方水煎液进行了血清药化学的比较研究。研究结果显示,利用溶剂法从复方中分离得到的总皂昔经Wistar大鼠灌胃后,其血清样品在HPLC色谱图中有9个主要色谱峰,其中保留时间为33.256min的色谱峰与酸枣仁皂营A对照品色谱峰一致;溶剂法所得酸枣仁皂营部位给药后制得的血清样品中,仅检测到微量的酸枣仁皂昔A的色谱峰;而在复方水煎液给药后制得的血清样品色谱图中,几乎检测不到酸枣仁皂昔A的色谱峰。从而表明复方给药较单方给药更有利于有效成分在体内的吸收,溶剂法提取分离总皂昔较水煎法易于提取皂普类成分。以上研究对于探讨酸枣仁汤镇静催眠作用的物质基础具有一定的参考意义。 采用HPLC一ELSD色谱法对复方酸枣仁汤及其君药酸枣仁的含量分析进行了比较研究。以其主要有效成分酸枣仁皂昔A为指标建立的含量测定方法,具有灵敏度高、重现性好、可靠性强的特点。研究结果表明,复方酸枣仁汤中酸枣仁皂营A的含量较单味药高。从而说明复方中各药的化学成分在提取制备过程中,对其有效成分产生互溶助溶作用,有利于这类成分的溶出,提高了转移率。关键词:酸枣仁汤色谱指纹图谱血清药化学 含量测定酸枣仁皂昔A GC一MS超临界二氧化碳萃取