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目的 通过对实验动物(大鼠)进行大剂量维生素C(VC)的干预,观察大剂量的VC对实验动物DNA氧化损伤、抗氧化和免疫系统的影响,并探讨其机制。 方法 选用健康初断乳Wistar大鼠,体重70~90克,雌雄各半,按体重、性别随机分为4组,每组12~14只,分别为对照组(基础饲料)、补充VC 2000mg/kg、5000mg/kg、10000mg/kg饲料四组,实验期为8周,自由进食及饮水。实验过程中,定期称大鼠体重,第6~7周留取尿液;实验结束后腹主动脉取血进行各项指标的检测分析。采用单细胞凝胶电泳法检测DNA自发及诱导氧化损伤的情况;采用荧光偏振法测定红细胞膜流动性;采用毛细管电泳法测定尿中O6-甲基鸟嘌呤的含量;采用2、4-二硝基苯肼法测定大鼠血浆和肾上腺中VC的含量;采用试剂盒测定血浆中SOD、MDA和GSH-Px以及红细胞膜中的MDA和GSH-Px。采用MTT法测定大鼠外周血淋巴细胞转化率,观察其增殖活性。 结果 经过8周VC补充后,对各组大鼠机体VC水平、抗氧化能力、细胞功能等进行了分析,结果显示:①血浆和肾上腺VC含量在VC补充各组明显增加,与对照组血浆VC含量(405.77μg/100mL)相比,2000、5000和10000mg/kg饲料组的血浆VC含量分别上升达425.69、460.00和515.97μg/100mL,其中10000mg/kg饲料组的VC含量比对照组升高27.2%(P<0.01),比2000mg/kg饲料组升高21.2%(P<0.01)。肾上腺VC含量的分析结果也显示VC补充各组大鼠肾上腺VC水平明显升高,10000mg/kg饲料组肾上腺VC含量比对照组升高40.1%(P<0.01),比2000mg/kg饲料组升高28.7%(P<0.05)。②DNA损伤分析结果显示:各组DNA自发损伤无差别(F=0.485,P>0.05)。10μmol/L的H2O2诱发DNA损伤时,各组间有明显差别(F=3.310,P<0.05),随剂量增加,DNA损伤逐渐加重,5000mg/kg饲料组DNA损伤比对照组升高28%(P<0.05),10000mg/kg饲料组比对照组升高49%(P<0.01)。各组O6-甲基鸟嘌呤的含量差别显著(F=4.276,P=0.01),10000mg/kg饲料组含量最高,比对照组升高36%(P<0.05)。③抗氧化酶活性分析结果显示:各组血浆SOD含量有明显差别(F=6.213,P<0.01),随着补充剂量的增加,各干 中文摘要预组有先上升后下降的趋势,Zooomg/kg饲料组SOD含量高于对照组(尸<。.05),I0000mg/kg饲料组SOD含量低于对照组(尸<。.05)。各组红细胞膜GSH一Px活性分别为1 82.22、213.58、138.13和102.11酶活力单位,Z000mg/kg饲料组GSH一Px活性最高,但与对照组比较无差别(尸>。.05),I000Omg/kg饲料组GSH一Px活性最低,比对照组下降44.0%(尸<。.05)。④血浆脂质过氧化产物MDA含量各组间有明显差别(F一9.466,P<0.01),2000 mg/kg饲料组MDA含量比对照组降低25.7%(尸<0.01),l000omg/kg饲料组MDA含量对照组增高20.3%(尸<0.05)。各组红细胞膜MDA含量有明显差别(F一4.54,尸<0.01),各VC干预组的MDA值均低于对照组,其中Z000mg/kg饲料组的MDA含量最低,比对照组下降44.4%(尸<0.01)。⑤细胞功能活性分析显示:红细胞膜流动性,无论P值和刀值,各组间比较均有差别(F值分别为4.272、3.155,P值均小于0.05)。其中Z000mg/kg饲料组红细胞膜流动性最高,明显低于对照组(尸<0.05),l0000mg/kg饲料组红细胞膜流动性最低,但与对照组比较无差别(尸>0.05)。外周血琳巴细胞增殖活性分析显示各组大鼠淋巴细胞转化率无明显差别(F一0.485,尸>0.05),但ZOO0mg/kg饲料组淋巴细胞转化率高于对照组和l000Omg/kg饲料组(尸均<0.05)。 结论①补充较高剂量(Z000mg/kg饲料)VC可使大鼠血浆SOD水平明显增高,使血桨和红细胞膜MDA含量明显降低,增加大鼠的红细胞膜流动性。②长期大剂量(10000mg/kg饲料)补充VC可明显增加大鼠血浆和肾上腺VC含量,使大鼠血浆SOD水平和红细胞膜GSH一Px的活性明显降低,增加大鼠体内脂质过氧化损伤,使血浆MDA水平升高,尿中06一甲基鸟嗦吟排出量增加。当VC补充剂量超过S000mg/kg饲料时,可使由10拜mol/L HZO:诱导的DNA氧化损伤增强。 总之,给大鼠补充Z000mg/kg饲料的vC对大鼠机体的抗氧化和细胞免疫功能有一定的促进作用,对DNA损伤没有影响;当补充剂量超过Z000mg/kg饲料时,在一定程度上,反而会促进大鼠机体的氧化损伤,尤其是H20:诱导的DNA损伤。