犬骨髓间充质干细胞移植后缝隙连接分化情况及其致心律失常源性研究 急性心肌梗死由于发病急骤，死亡率高是一种严重危害人民健康的心脏疾患。目前治疗进展迅速，从早期的溶栓疗法到急诊PCI技术的开展，挽救了越来越多的生命，然而基于血运重建的治疗措施，对于已经坏死的心肌则无能为力。近年来通过以干细胞为基础的细胞移植技术对于冠心病心肌梗死后的治疗取得了良好的效果，为梗死区坏死心肌的修复提供了一条崭新的途径。尽管干细胞移植后，有资料表明可分化为心肌特异的收缩蛋白及缝隙连接，但是部分临床应用结果提示其致心律失常源性作用不容忽视，本研究针对骨髓间充质干细胞心脏局部注射后，是否具有致心律失常源性以及是否对心肌梗死后心律失常的发生基质具有改善作用进行观察；同时由于缝隙连接重构对于心肌梗死后各向异性传导以及室性心律失常的发生有密切关系，所以对干细胞移植后缝隙连接的分化情况尤其是缝隙连接的分化及空间分布情况进行了较为系统的观察。 犬骨髓间充质干细胞的分离纯化与体外培养 目的：探讨更为简便、经济的建立骨髓间叶干细胞体外分离、培养、扩增与鉴定方法，并观察其生物学特性，为干细胞细胞移植治疗急性心肌梗死奠定基础。 方法：抽取犬骨髓液20mL，首次采用1.068g／ml分离液，通过密度梯度离心法分离骨髓单核细胞；利用细胞贴壁筛选法纯化骨髓间充质干细胞；以LG-DMEM及15％FBS添加100U／ml青霉素，100μg／ml链霉素，and 25μg／ml二性霉素B培养液于37℃、5％CO2环境下培养；应用干细胞表面标志蛋白，不同诱导剂进行多向诱导分化等方法进行犬骨髓间充质干细胞的鉴定。 结果：骨髓间充质细胞通过密度梯度离心法与贴壁培养法分离后，在LG—DMEM加15％FBS培养液中生长良好。孵育24小时即可见细胞贴壁生长，