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本文主要以中国对虾为实验对象,通过ICR小鼠致敏模型获得小鼠阴性和阳性血清,再利用双向电泳和Western blotting技术鉴定中国对虾中的主要过敏原,质谱分析并通过Mascot数据库搜索后得到该蛋白的具体信息,再对全蛋白中的过敏蛋白分离纯化,得到纯度高的过敏蛋白,利用P815肥大细胞致敏模型来分析影响原肌球蛋白致敏性的因素。本文得到以下结果：1.考虑到应用于双向电泳的裂解液主要成分是尿素等物质,对小鼠具有一定的危害,而用试剂盒提取的蛋白浸出液有很高的盐浓度,不适合用来做双向电泳,故采取两种不同提取液对中国对虾全蛋白提取来进行小鼠实验,通过行为打分和ELISA测定血清中IgE和IgG1来判断小鼠的致敏效果。发现这两种方法提取的全蛋白种类及含量接近,对小鼠的致敏性效果也相似,表现在随着饲养的进行,过敏症状越来越明显,且在激发期第二周致敏效果最好,这表明这两种蛋白都能使ICR小鼠过敏,ICR小鼠致敏模型建立成功；2.建立双向电泳分离中国对虾体系,得到较好的分离效果条件：80000vhr、12.5%分离胶、被动水化。再通过双向电泳联立Western blotting鉴定中国对虾的过敏原,找出差异蛋白点进行质谱分析并进行Mascot数据库搜库,得到两种不同的蛋白,分别为40.2kDa,等电点分别为6.0和6.2的精氨酸激酶和分子量为35.8kDa,等电点为4.6的原肌球蛋白,并得到这两种蛋白的氨基酸序列。经过与其他物种的过敏蛋白的氨基酸序列对比,发现这两种蛋白分别与甲壳类动物的精氨酸激酶和原肌球蛋白的同源性高达95%以上,说明实验鉴定的中国对虾中的精氨酸激酶和原肌球蛋白是引起过敏的过敏原,而分析得到的两种不同等电点的精氨酸激酶,认为可能存在不同蛋白质修饰的同工酶,造成其存在等电点不同的蛋白点；3.采用盐析的方法将中国对虾中的原肌球蛋白分离出来,将其纯化得到纯度较高的原肌球蛋白,通过SDS-PAGE和质谱鉴定,发现电泳图中主要为36kDa的蛋白条带,纯度为95%以上,质谱鉴定出这与之前鉴定出来的原肌球蛋白相似度达到90%。最后用过体外细胞致敏模型对其性质进行分析。经过温度、pH等条件的变化,并模拟胃肠道消化后,在P815肥大瘤细胞模型中分析其活性,发现原肌球蛋白是一种耐热、耐酸的蛋白,能一定程度上被胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶降解,降低其致敏性,但不能完全使其失去活性。