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目的:利福平单独或与其他抗结核药物联用时,都可引起程度不同的肝损伤,但具体发病机制还未明确。高迁移率族蛋白B1是近年发现的一种致炎细胞因子,与异烟肼联合利福平致大鼠肝损伤的进展有关。本研究的目的:1)复制利福平诱导的小鼠肝损伤模型,观察HMGB1释放抑制剂—丙酮酸乙酯(EP)对该模型的影响并探讨其可能机制。2)应用HMGB1多克隆抗体、RAGE单克隆抗体阻断HMGB1-RAGE信号转导通路,观察其对利福平诱导的肝损伤模型小鼠的影响。方法:1)将24只SFP级C57BL/6小鼠随机分为3组,即正常组、RFP组和EP组,每组8只。RFP组和EP组小鼠每天给予利福平200 mg/(kg·d)定时灌胃,正常组给予等量羧甲基纤维素钠灌胃。EP组小鼠每天给予丙酮酸乙酯40 mg/(kg·d)腹腔注射,余两组分别给予等量格林氏液腹腔注射。造模后第7天处死小鼠,检测小鼠血清ALT、TBIL、DBIL、ALP,观察小鼠肝脏病理学变化,检测小鼠肝组织TBA、AC-HMGB1水平,测定肝组织MDA及SOD的表达,检测HMGB1在组织中的表达情况。2)将40只C57BL/6 SFP级小鼠随机分成5组,即正常组、RFP组、HMGB1抗体干预组、RAGE抗体干预组和IgG对照组,每组8只。除正常组外,其余各组小鼠每天给予利福平200 mg/(kg·d)定时灌胃。HMGB1抗体干预组分别于造模的第1、3、5天灌胃利福平前半小时腹腔注射HMGB1多克隆抗体5mg/Kg;RAGE抗体干预组分别于造模的第1、3、5天灌胃利福平前半小时腹腔注射RAGE单克隆抗体0.5mg/Kg;IgG对照组分别于造模的第1、3、5天灌胃利福平前半小时腹腔注射兔抗鼠IgG 5mg/Kg;RFP组小鼠腹腔注射等量的溶剂作为对照。造模后第7天处死小鼠,检测小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT、TBA水平,观察小鼠肝组织病理学变化,western blot方法检测肝组织HMGB1蛋白表达的水平。结果:1)与正常组比较,RFP组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT水平明显升高(P<0.05);肝细胞可见显著的空泡变性及脂肪变性,局部肝细胞可见嗜酸性变、核固缩或溶解;肝组织TBA、MDA的含量提高(P<0.05),SOD减少(P<0.05),HMGB1及AC-HMGB1表达增多(P<0.05),HMGB1胞浆表达为主。与RFP组比较,EP组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT水平降低(P<0.05);肝组织病理学变化改善;肝组织TBA、MDA的含量降低(P<0.05),SOD增多(P<0.05),HMGB1及AC-HMGB1的表达水平降低(P<0.05),HMGB1胞核表达为主。2)与正常组比较,RFP组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT、TBA水平升高(P<0.05);肝细胞空泡变性、脂肪变性明显,部分肝细胞可见核溶解或固缩,局部可见点状坏死及炎性细胞浸润;肝组织中HMGB1、RAGE、NF-kB表达明显升高(P<0.05),BSEP表达明显下降(P<0.05)。与RFP组比较,IgG对照组的上述指标均无显著差异(P>0.05);HMGB1抗体干预组及RAGE抗体干预组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT、TBA水平降低(P<0.05),肝组织病理学变化改善;肝组织中HMGB1、RAGE、NF-kB表达明显下降(P<0.05),BSEP表达明显升高(P<0.05)。与IgG对照组相比,HMGB1抗体干预组组及RAGE抗体干预组均明显改善(P<0.05)。上述指标在.HMGB1抗体干预组和RAGE抗体干预组之间无明显差异(P>0.05)。结论:1.HMGB1的分布及其表达强度与肝脏的病理改变程度基本一致,提示HMGB1表达增加与分布异常、AC-HMGB1增加与利福平诱导肝损伤的进展有关。2.丙酮酸乙酯可通过抗氧化,降低HMGB1及其乙酰化水平、调节HMGB1分布来减轻利福平致药物性肝损伤。3.阻断HMGB1-RAGE信号通路可以明显减轻利福平致小鼠肝损伤的严重程度,降低肝脏HMGB1、RAGE、NF-kB的表达,提示HMGB1-RAGE-NF-kB信号通路参与了利福平诱导的肝损伤发展过程。