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目的:建立人肝癌BEL7404耐药株,并检测该耐药株的生物学特性,为应用基因技术逆转肿瘤多药耐药性提供实验模型。方法:通过盐酸阿霉素（ADM）长期筛选建立人肝癌细胞耐药株BEL7404/ADM。应用四甲基偶氮唑（MTT）法及流式细胞仪（FCM）对该细胞株的相关特性（药物敏感性、倍增时间、P-糖蛋白功能、细胞周期）进行系统研究。结果:ADM浓度梯度递增法连续作用BEL7404细胞10个月,得到肝癌细胞耐药株BEL7404/ADM。经MTT法检测耐药株IC50是敏感株的68.7倍,耐药细胞的倍增时间延长了6.49h,罗丹明123蓄积实验证实耐药株的P-糖蛋白活性高于敏感株,两者细胞周期无明显差异性。结论:成功建立了人肝癌BEL7404耐药细胞株,该细胞株的生物学特性明显不同于敏感细胞株;多药耐药性主要与P-糖蛋白的高表达有关。目的:通过转染野生型p53基因（wt-p53）并联合盐酸阿霉素作用于人肝癌细胞耐药株BEL7404/ADM及其敏感株,研究二者联合作用对肝癌细胞耐药性的影响。方法:将克隆有wt-p53的pUHD10-3质粒,通过脂质体(梭华-SofastTM)介导分别转染肝癌敏感株BEL7404和耐药株BEL7404/ADM,同时,在培养液中加入ADM,用MTT法分析细胞的生长情况;荧光显微镜观察两种细胞的形态改变;流式细胞仪对它们的细胞周期和凋亡情况进行分析。最后用罗丹明123蓄积实验检验联合作用对耐药株P-gp活性的影响。结果:wt-p53转染敏感株和耐药株后,细胞的生长均受到抑制:在转染第4天,敏感细胞BEL7404的生长抑制率达52.53%,ADM作用组的生长抑制率达46.03%,联合作用组细胞的生长抑制最明显,为73.86%。而耐药细胞BEL7404/ADM转染p53的生长抑制率达47.01%,单独ADM作用为53.72%,联合作用后生长抑制率最高,为69.15%。统计学检验,联合作用对两种细胞生长的抑制程度差异无统计学意义。流式细胞仪分析两种细胞的细胞周期,结果为:单独转染p53基因,不能阻滞任何一种细胞,同时也不促进细胞凋亡的发生;同样单独ADM作用细胞虽能被阻滞在G2期,能促进敏感株凋亡的发生,但对耐药株无促进作用。而联合作用后细胞均被阻滞在G1期,不仅能促进敏感株凋亡的发生还能促进耐药株凋亡的发生,且凋亡率是最高的（敏感细胞和耐药细胞的凋亡率分别为27.8%和25.9%,两者凋亡率无显著性差异）。罗丹明123蓄积实验显示ADM作用耐药株96h后其细胞P-gp的活性明显高于对照组,而联合p53作用后其活性降低,与对照组的差别无统计学意义。结论:wt-p53能明显抑制肝癌耐药株和敏感株的生长,联合ADM后对细胞的抑制作用更明显,并能促进细胞发生凋亡,而且联合作用对耐药株的影响程度与敏感株的无差异性。wt-p53与ADM联合作用能逆转耐药株P-gp的活性,增加细胞内ADM的含量。