黄芪甲苷干预PMVECs调控miRNA--210--3p影响血管新生相关因子的研究及临床分析

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:abcd432110000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本研究通过归类整理张伟教授临床治疗间质性肺疾病(ILD)的中药复方,总结其用药规律。并通过大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)体外培养,观察中药单体黄芪甲苷对大鼠PMVECs的干预作用,探讨其是否通过调控miRNA-210-3p而影响下游血管新生因子的表达,如:血管内皮生长因子(VEGF),同时分析其对大鼠PMVECs增殖、迁移的影响,从而探讨黄芪甲苷干预血管生成的机制,为ILD的临床治疗提供有效的思路及理论支持。
  方法:(1)临床部分整理2018年1月-2019年9月张伟教授诊治的ILD门诊患者首诊病例,从中选择符合本次研究纳入标准病例249例,处方249首。通过频数分析的方法,整理药物的频次、分类,以此分析张伟教授治疗ILD的用药规律。(2)细胞实验部分选取大鼠PMVECs为研究细胞,以黄芪甲苷作为实验药物,将实验分为5组:空白对照组(N)、IL-6干预组(A)、IL-6干预后给予黄芪甲苷组(B)、IL-6干预后转染miRNA-210-3p mimis组(C)、IL-6干预后转染miRNA-210-3p mimis NC组(D)。首先用CCK-8法检测细胞增殖,得出IL-6的工作浓度及黄芪甲苷合适浓度,进行后续实验。除N组外,其余各组应用IL-6处理12h。然后B、C、D组分别加入黄芪甲苷、miRNA-210-3p mimis、miRNA-210-3p mimis NC干预24h,A组及N组不予任何处理。应用CCK-8法检测各组细胞增殖,Transwell检测各组细胞迁移,RT-PCR检测各组miRNA-210-3p和VEGF mRNA表达,Western blotting检测各组VEGF蛋白水平。
  结果:(1)在纳入研究的249首中药复方中,包含81味中药,总频次3505次,剔除甘草(249次),总频次3256次。其中应用30次以上的有34种,共使用2955次,占药物总频次(剔除甘草后)的90.76%,其中黄芪使用频次最高;使用频数大于60次的中药有24味,将这些中药归类,药类使用次数最高的为化痰药、补气药和止咳平喘药。(2)根据CCK-8结果,将IL-6的浓度(1μg/mL)定为干预浓度,黄芪甲苷浓度(10μM)定为实验浓度。IL-6干预大鼠PMVECs后,与N组相比,IL-6能抑制细胞的增殖和迁移,下调miRNA-210-3p,VEGF mRNA表达下降,VEGF蛋白水平降低。过表达miRNA-210-3p可促进细胞的增殖及迁移,miRNA-210-3p表达增加,上调VEGF mRNA,并使VEGF蛋白水平升高;与A组相比,B组可以明显促进细胞的增殖及迁移,提高miRNA-210-3p的表达,并使VEGFmRNA表达增加,VEGF蛋白水平升高。
  结论:(1)张伟教授在临床治疗间质性肺疾病中多应用黄芪配伍治疗,重视补益肺脾之气,同时兼顾活血化瘀、化痰止咳平喘,临床治疗有一定效果,可指导辨证、用药。(2)黄芪甲苷能够促进大鼠PMVECs的增殖及迁移,促进VEGF的表达,可能是通过上调miRNA-210-3p的表达引起的。
其他文献
学位
学位
日本血吸虫病是一种严重危害社会的人兽共患寄生虫病,它的病理损伤主要是成虫排出的虫卵沉积于肝脏引发慢性炎症,持续的慢性感染导致损伤修复过度,继而诱导虫卵肉芽肿的形成,导致肝脏的纤维化~([1])。吡喹酮(Praziquantel,PZQ)因其安全廉价、杀虫高效等优点,被推荐为临床治疗日本血吸虫病的首选药物。患者接受吡喹酮的杀虫治疗后,虫卵的排出得到有效抑制,但是已经形成的虫卵肉芽肿仍然会继续发展,造
学位
学位
学位
学位
学位
精密及超精密加工及其检测装置是科技快速发展的需要,宏微结合的精密定位系统因其具有大位移和高精度的优势而受到广泛关注。目前国内外对于宏微精密回转进给的相关研究还非常少,本文研究的宏微精密回转进给系统有一定的理论意义和实际应用价值。本文首先在柔性铰链及压电陶瓷驱动器工作原理基础上,设计了一种包含多个柔性较链的能将压电陶瓷驱动器的直线运动转换成回转运动的转换机构;分析了该转换机构的运动原理及输入和输出的
学位
学位
学位