枸杞叶总黄酮对人体真皮成纤维细胞光老化的保护作用及分子机制

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xsb
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的用UVA联合8-MOP复制人真皮成纤维细胞(HDFs)的光老化模型,研究枸杞叶总黄酮(TFL)对光老化人体真皮成纤维细胞(HDFs)的保护作用及相关机制。方法1.70%的乙醇提取TFL粗品,硝酸铝-亚硝酸钠比色法制定芦丁标准曲线,得到TFL粗品得率及质量浓度;2.观察不同浓度(0、25、50、100、200、400、800μg/m L)的TFL对HDFs增殖活性的影响,确定TFL干预浓度范围;3.CCK-8检测UVA/8-MOP复制HDFs光老化模型的最小无毒性UVA辐射剂量;4.HDFs分为空白组、模型组和干预组(低、中、高浓度的TFL干预细胞24h),倒置显微镜、CCK-8、SA-β-gal染色法、ELISA等观察和检测不同浓度的TFL对光老化HDFs形态、增殖活性、SA-β-gal阳性细胞染色、SA-β-gal活性及I型胶原蛋白、HA和Hyp含量的影响;5.流式细胞仪荧光探针法检测不同浓度的TFL对光老化HDFs凋亡的影响;6.酶标仪比色法和ELISA分别检测不同浓度的TFL对光老化HDFs SOD活性,CAT、MDA含量及LDH漏出量的影响;7.Western blot检测不同浓度的TFL对光老化HDFs MAPK信号通路MMP-1、MMP-3、磷酸化JNK、P38蛋白表达的影响。结果1.提取TFL的得率是41.9%,质量浓度为34.6%备用;2.TFL质量浓度在25-100(μg/m L)对HDFs的增殖活性有促进作用,故选择25、50、100μg/m L为后续实验的TFL低、中、高浓度;3.HDFs在9(J/cm~2)的UVA照射和50(mg/L)的8-MOP联合作用下,显微镜下细胞形态变大、分支增多、细胞间隙增大、周边浑浊。与空白组相比,模型组的细胞增殖活性降低(P<0.01)、SA-β-gal阳性细胞染色率降低(P<0.01)、细胞凋亡率增高(P<0.01),表明HDFs光老化模型复制成功;4.TFL干预光老化HDFs后细胞形态饱满、间隙缩小、细胞变小、分支减少。与模型组相比,不同浓度的TFL能降低光老化HDFs的细胞凋亡、SA-β-gal阳性细胞染色率、SA-β-gal活性以及LDH漏出量、MDA含量(P<0.05或P<0.01),存在量效关系;5.不同浓度的TFL能提高光老化HDFs的增殖活性、SOD和CAT的活性以及I型胶原蛋白、Hyp、HA的含量,与模型组相比(P<0.05或P<0.01),且存在一定的量效关系;6.与模型组相比,TFL能下调光老化HDFs MAPK信号通路MMP-1、MMP-3以及磷酸化JNK、P38的蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论1.TFL通过减轻过氧化损伤,促进细胞增殖活性和I型胶原蛋白的分泌水平发挥抗光老化作用;2.TFL可以通过下调光老化HDFs中MMP-1、MMP-3的表达,抑制细胞外基质的降解,其作用机制与降低MAPK信号通路中的磷酸化JNK、P38蛋白表达水平有关。
其他文献
2011年在国家产业政策与市场的共同作用下,催化了一种新模式并购基金——“上市公司+PE”型并购基金活跃在资本市场。但实践中,该模式并购基金也引发许多质疑,如其应用是否有利于改善企业经营状况与实现企业价值提升等等。本文首先对该模式并购基金的产生背景、发展状况及相关理论进行简单介绍,其次分析其对上市公司价值创造的机制和路径,最终从三个维度(短期价值、协同效应以及EVA)评价其对企业价值的影响。研究最
学位
报纸
清代盛京昭陵的建筑、管理、沿革所构成的历史文化风貌与清王朝的兴衰息息相关。昭陵初建,其工程时间之短、建筑规模之小,反映了清初国力之有限以及满族早期的节葬与火葬习俗。清入关后定鼎中原,随着国力的提升,对昭陵进行了“积累式”的补建修缮,使陵寝格局逐渐完善,陵寝景观庄严壮丽,民族特质别具一格,建立起完善的陵寝管理体系。清末在列强的蚕食鲸吞中,清政府虽然屡次表达出对盛京陵寝的关注与重视,但实际上却透露出“
期刊
本文主要在宏观层面探讨不同收入水平国家教育社会经济回报的差异性,分析中等收入国家与高收入国家收入增长动力的区别。本文基于国际经济指标面板数据,使用固定效应估计模型,辅以系统广义矩估计模型和混合最小二乘估计模型,对宏观教育社会经济回报进行实证分析。通过模型估计结果发现:不同收入水平国家教育社会经济回报存在一定规律的差异性,但与以往研究不同的是,低收入国家和中低收入国家教育社会经济回报不明显,中高收入
学位
注册商标不使用撤销制度是指商标被准予注册登记后,他人以商标权人在连续一段时间内不使用为由向商标管理部门申请予以撤销,由商标管理部门和司法机关依法审查是否予以撤销的法律制度,学术界的一般说法将我国该制度简要称为“注册商标撤三制度”。如何使“注册商标撤三制度”能够发挥清理未使用商标资源的作用,使该制度与商标法立法上完成统一,是行政和司法部门审查注册商标不使用撤销案件提供参考和依据成为相关研究的重要方向
学位
近年来,随着营改增的实施、国家提速降费的要求、长漫费取消和携号转网等政策的不断落地推进,通信企业普遍面临着较大的运营压力。5G时代的到来,更为通信运营商带来了新的挑战,一方面须加快5G基站建设进程以抢占市场份额,另一方面也须兼顾2/3/4G存量用户的运营和维系。新形势下,通信运营商们须重新审视企业内外部环境,加强关注5G技术对企业的影响程度,以全面把握5G时代的新机遇、敏捷应对各类新挑战,重塑企业
学位
近年来,交通的快速发展推动了城市轨道交通的发展。到2020年年末,全国已经有44个大中城市(不含港澳台)通车,累计经营地铁线路达到了233条,总营业里程数为7545.5公里,包括4660座站点,实际运行旅客列车有2528万列次,客流量达到175.9亿人次,进站量达109.1亿人次。在市场经济的大背景下,城市轨道交通必然要以乘客需求为导向,提升服务质量,以符合乘客日益增强的期待标准。乘客满意度是评价
学位
航空发动机风扇叶片作为航空发动机的重要零件,其结构轻量化设计一直是航空工业研究中的热点与难点,传统的实心风扇叶片具有重量大、油耗高、离心力大等缺点,已经不能满足当今航空发动机的低油耗和重量轻等要求,实心风扇叶片已经被结构更为优越的空心叶片所替代。本文主要针对鸟撞和飞行两种工况下的航空发动机风扇叶片,从拓扑优化和结构设计两个方面探索其结构轻量化设计方法。在鸟撞工况下,对实心叶片进行拓扑优化设计研究,
学位
水资源作为人类生产生活最重要的物质基础,事关人类生存发展和社会经济的协调可持续。洞庭湖流域作为国家级生态经济区,是生态优先绿色发展战略的重点实施区域,但随着大型水利设施的建设、城镇化、工业化进程的推进,洞庭湖流域水质性缺水、工程性缺水、季节性缺水等问题日益凸显,严重影响了区域人民的生产生活和社会经济的可持续发展。如何提高洞庭湖流域水资源承载力、统筹好水资源承载力系统的协调发展,不仅关系到洞庭湖流域
学位
随着互联网媒介的发展,以及智能媒体的多元应用,广告实践活动不断涌现出新的表现形式,原生广告、程序化广告、VR/AR广告等多种广告形态层出不穷,广告变得越来越不像广告的现实宣告着广告迎来了“泛化”时代,泛广告也使得”广告“的传统概念界定发生较大的转变。目前,针对新媒体和短视频为媒介的泛广告研究远远不足,本文以广告符号学视域探究新媒体时代下以短视频为媒介的泛广告是一个新兴的研究视角。抖音App作为我国
学位