去整合素是一种提取自蛇毒的抗粘附的蛋白的总称,它富含半胱氨酸,并且分子量都很低,大部分去整合素含有 R-G-D( Arg-Gly-Asp )序列或 K-G-D(Lys-Gly-Asp)序列。目前国内外有许多克隆自不同种属蛇毒的去整合素蛋白,对其功能的研究也有很深入的进展。在与细胞粘附作用相关的领域,去整合素有着广泛的应用。Adinbitor 是本实验室王继红博士从中国白眉蝮蛇蛇毒中克隆的去整合素基因,经过转化,诱导后进行可溶性表达并经组氨酸亲和层析纯化,获得的分子量为9 kD 的均质蛋白,具有去整合素的特征性模体 R-G-D,有抑制肿瘤细胞转移,抑制人脐静脉血管内皮细胞的增殖及诱导其凋亡等作用[1]。 本实验是在王继红博士研究工作的基础上[1],通过观察经纯化的Adinbitor 对小鼠神经胶质瘤细胞(C6)增值的抑制,细胞形态学改变,DNA 电泳变化,线粒体跨膜电位变化,酶学变化,来探讨 Adinbitor对 C6 细胞的诱导凋亡的作用及其机制,以期为 Adinbitor 能在临床上发挥治疗肿瘤的作用提供理论上的依据。 我们将小鼠神经胶质瘤细胞(C6)培养于含有 10%胎牛血清的DMEM(Dulbecco’s modified essential medium)培养液中,细胞培养于37℃、5% CO2 和 90%湿度的培养箱中。分别以不同浓度的 Adinbitor处理 C6 细胞并观察它们对靶细胞的作用特点;细胞形态学以倒置显微镜观察培养瓶中的 C6 细胞,并以荧光显微镜观察 C6 细胞在加入Adinbitor 后经 hoechstr 染料进行荧光染色后的观察其细胞形态学变化,