辣椒脱水素基因CaDHN4抗逆功能的鉴定

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wjsxyxjc
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辣椒(Capsicum annuum L.)是一种受世界人们所喜爱的蔬菜作物。不同地区自然环境存在很大的差异,在种植过程中由于受到不同环境条件的影响,辣椒产量会受到一定的影响。因此,通过分子生物学手段,挖掘胁迫相关基因,并阐明其分子机理对于分子育种具有重要作用。脱水素作为一种胁迫响应相关基因,已被科学家广泛的研究,但在辣椒中的研究并不多。实验室前期通过生物信息分析了辣椒脱水素家族,并对辣椒幼苗低温处理后基因表达量分析,结果显示辣椒CaDHN4基因表达量最高,因此本试验选取辣椒脱水素CaDHN4基因进行研究。主要取得的结果如下:(1)亚细胞定位分析辣椒脱水素基因CaDHN4定位在细胞核和细胞膜。(2)在低温、盐和干旱胁迫下,CaDHN4基因在辣椒中发生沉默会降低植株抗性。具体表现为:低温处理后CaDHN4基因沉默辣椒植株叶片萎蔫更加严重,相对电导率更高、叶绿素含量更低、DAB和NBT染色更深。盐和甘露醇处理后,离体叶圆片褪绿更加严重,相对电导率更高、叶绿素含量更低。(3)转辣椒CaDHN4基因拟南芥能够提高对低温、盐和干旱胁迫的抗性。低温处理下野生型植株失水更严重,测定的相对电导率、失水率及丙二醛含量更高。盐和甘露醇处理后,转基因株系在种子萌发期、幼苗期及成熟期均表现出更好的长势,更低的受伤害程度,测定胁迫响应相关的几个生理指标与表型差异一致。(4)CaDHN4基因启动子序列具有响应盐、低温、干旱、高温等逆境及赤霉素、茉莉酸甲酯、脱落酸等激素相关的顺式作用元件。(5)转CaDHN4基因启动子拟南芥组织化学GUS染色在低温、氯化钠、甘露醇、自然干旱等胁迫逆境及脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸等激素处理下相比正常生长条件下染色更深。综合以上结果我们初步推测辣椒CaDHN4基因可以通过降低由过氧化物积累造成的膜脂质过氧化程度来保护细胞膜,从而增强胁迫抗性。
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