论文部分内容阅读
黄瓜(Cucumis sativus L.)又称胡瓜,王瓜,为一年生攀援草本植物,是一种世界性的重要蔬菜,也是中国种植面积最大的蔬菜种类之一。随着黄瓜生产的规模化、基地化、专业化,以及相关生态环境的变化,在黄瓜生产中枯萎病(Fusarium Wilt)问题显得十分突出,严重影响了黄瓜的产量和品质,甚至造成大面积绝产。 本实验以抗枯萎病的美国露地黄瓜自交系‘WIS2757’和感枯萎病的我国华北露地黄瓜自交系‘津研2号’及其120个F2单株为材料,对两个亲本和F2单株进行了苗期抗病性接种鉴定,并分别提取DNA。利用RAPD、AFLP标记方法获得了与抗黄瓜枯萎病基因相连锁的标记。 实验取得如下结果: 1.通过对120株F2代单株进行抗病性鉴定,结果表明有85株表现抗病,35株表现感病,经X2测验X2=1.11<X20.05(3.84),符合3:1的分离比例,证明黄瓜抗枯萎病基因由显性单基因控制。 2.采用BSA与RAPD技术相结合,利用780条RAPD引物对抗、感亲本进行筛选,其中有113条引物在两亲本之间表现多态性,但仅有引物S49在抗感组间多态性标记分别与两亲本的多态性标记相同。经F2单株分析,引物S49扩增出的特异DNA片段与WIS2757抗黄瓜枯萎病基因连锁,遗传距离13cM,DNA标记条带大约为300bp,定名为S49-300。 3.采用BSA和AFLP技术相结合,对抗感亲本及F2分离群体进行多态性分析,结果表明引物P-GTG/M-CCA扩增出的特异DNA片段与WIS2757抗黄瓜枯萎病基因连锁,遗传距离为10cM。将该特异DNA片段进行克隆测序,确定其长度为313bp,定名为P-GTG/M-CCA-313。 4.根据AFLP标记P-GTG/M-CCA-313克隆测序的结果设计引物,成功地将其转化成SCAR标记,遗传距离为10cM,命定名为SCAR-282。