论文部分内容阅读
目的:探讨GINS2(GINS complex subunit2,GINS复合物亚基2)基因对人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞生物学行为的影响。 方法:将靶向GINS2基因的shRNA慢病毒载体感染人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞,利用荧光显微镜观察各组细胞的感染效率。采用实时荧光定量PCR检测慢病毒感染前后GINS2mRNA表达水平的改变;采用Western Blot检测GINS2蛋白表达水平的改变;运用Celigo细胞成像分析细胞的生长能力;运用噻唑盐(MTT)法分析细胞的增殖能力;运用平板克隆形成实验分析细胞的体外成瘤能力;运用流式细胞术分析细胞的凋亡率。 结果:GINS2-shRNA慢病毒载体成功感染人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞,每株细胞分为shCtrl组和shGINS2组。实时荧光定量PCR结果显示,shGINS2组细胞中GINS2mRNA水平较shCtrl组明显降低;Western Blot结果显示,shGINS2组细胞中GINS2的蛋白表达水平较shCtrl组明显降低。体外功能实验结果如下:Celigo细胞计数结果显示,与shCtrl组相比,shGINS2组细胞的生长受抑制;MTT结果显示,与shCtrl组相比,shGINS2组细胞的增殖受抑制;平板克隆形成实验结果显示,与shCtrl组相比,shGINS2组细胞克隆形成数减少,提示shGINS2组细胞的体外成瘤能力减弱;流式细胞术结果显示,shGINS2组细胞的凋亡率较shCtrl组显著增高。 结论:体外实验表明,下调人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞GINS2的水平,可抑制鼻咽癌细胞的生长增殖,诱导细胞的凋亡;提示GINS2在鼻咽癌的发生发展中可能起促进作用。