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前列腺增生是中老年男性的一种常见病多发病,常用的化学药物都有一些副作用,而中成药前列康上市以来,疗效明确,未见明显的副作用,因此深入研究前列康的作用机理,分离分析其活性成份,对活性成份进行结构鉴定,有可能从中发现新的先导化合物,从而未发现新的化学药物打下基础。前列康的主要成分是油菜花粉。在前列康的说明书中所写的作用机理为抑制5α-还原酶将睾酮转化为二氢睾酮,但其中起作用的化学成分一直未能揭示。本文首先建立分析方法,在比较了液相色谱法,紫外分光光度法测定等几种酶活性方法之后,建立了一种基于气相色谱法的酶活性分析方法,分别测定底物睾酮的消失与产物二氢睾酮的生成速度,此方法特异性强,重现性好。以此方法为基础,然后将油菜花粉中提取的不同成分分别加入到酶反应体系中,测定酶抑制效果,以抑制率为指标筛选油菜花粉中的活性成份。酶从大鼠的睾丸组织中提取,分装,冷冻干燥保存,由于5α-还原酶存在TYPEⅠ和TYPEⅡ两种亚型,两种亚型分别在pH5和pH7的环境下表现出最大活性,而TYPEⅡ与前列腺增生的关系更为密切,因此选择适合TYPEⅡ型5α-还原酶的反应体系。实验研究表明,在油菜花粉的乙醇提取物中发现有活性成分,经过硅胶柱层析分离得到一种黄色的油状物质,并在体外再次证实了酶抑制活性。这种黄色油状物质经纯度检查,为单一化合物,经GC-MS,NMR鉴定,它是一种多聚醚,其分子量为456,分子式C28H56O4。酶抑制常数Ki=0.125,同样方法测得化学药非那雄胺的Ki=0.098。油菜花粉中还有多种微量成份,都有酶抑制作用。限于时间和经费的限制,无法逐个分离鉴定,此文为油菜花粉的深入研究打下了基础。