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目的:
检测microRNA-182(miR-182)在结直肠癌与相应癌旁组织中的表达，并评估其在结直肠癌发生发展和预后中的价值。此外，进一步检测miR-182在转移性结直肠癌中的表达并与非转移癌中的表达相比较，并用体外实验探讨其对结直肠癌细胞迁移能力的影响，进而评估miR-182在结直肠癌转移中的作用。
方法:
1.应用实时荧光定量PCR技术检测173对结直肠癌（包括148例非转移癌，25例转移癌）与对应癌旁组织miR-182的表达情况。
2.用Mann-WhitneyU检验或Kruskal-Wallis检验来评估miR-182表达情况与结直肠癌病人临床病理参数之间的关系。
3.以Kaplan-Meier法描述miR-182及其它参数的生存曲线，并用对数秩检验(log-ranktest)比较各生存曲线之间的差异。
4.用COX相对危险回归法分析miR-182及其它参数在结直肠癌中的预后价值。
5.体外用脂质体2000(lipofectamineTM2000)将miR-182模拟物及阴性对照瞬时转染结直肠癌HT-29细胞，并用实时荧光定量PCR检测各组转染效率。
6.用transwell小室实验观察各实验组细胞迁移数，来研究miR-182对结直肠癌细胞HT-29迁移能力的影响。
结果:
1.结直肠癌组织中miR-182的表达水平显著高于对应癌旁组织(p＜0.001)，转移性癌组织miR-182的表达显著高于非转移癌(p=0.0166)。
结果显示miR-182在不同组织中的表达差异较大，在148对非转移结直肠癌组织中的相对表达量是0.147(0.075-0.277){中位数（四分位数）），其对应癌旁组织中的相对表达量是0.051(0.019-0.117){中位数（四分位数））;另外miR-182在25对转移性结直肠癌组织中的相对表达量是0.254(0.134-0.538){中位数（四分位数）），其对应癌旁组织中的相对表达量是0.045(0.014-0.131){中位数（四分位数））。
2.结直肠癌组织miR-182表达水平与患者临床病理参数的关系
结直肠癌患者组织miR-182表达水平与患者的肿瘤大小(p=0.016)，局部淋巴结转移(p=0.008)和临床分期(p=0.020)密切相关，而与患者的年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤浸润程度和分化程度无关(p＞0.05)。
3.结直肠癌组织miR-182表达水平与患者生存时间相关
随访的148例结直肠癌患者中，五年总体生存率为56.8％，根据miR-182在结直肠癌组织中表达的中位数分成高表达组和低表达组，其中miR-182高表达组的五年生存率为43.2％，miR-182低表达组的五年生存率为70.3％，可见miR-182高表达组的生存率显著低于低表达组(p=0.001)。通过Kaplan-Meier生存曲线分析显示结直肠癌患者的生存时间还与肿瘤浸润程度(p=0.022)，局部淋巴结转移(p＜0.001)和临床分期(p＜0.001)密切相关，而与患者的年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤大小和分化程度无关(p＞0.05)。
4.COX相对危险回归法结果显示miR-182表达水平是结直肠癌患者独立的预后因素
COX相对危险回归法单因素分析显示，结直肠癌组织中miR-182表达水平(HR=2.313;95％CI，1.379-3.879;p=0.001)，肿瘤浸润程度(HR=2.214;95％CI，1.094-4.483;p=0.027)，局部淋巴结转移(HR=3.523;95％CI，2.105-5.899;p＜0.001)和临床分期(HR=2.975;95％CI1.943-4.555;p＜0.001)都与结直肠癌患者预后相关;COX相对危险回归法多因素分析显示，miR-182表达水平(HR=1.790;95％CI，1.057-3.032;p=0.030)和局部淋巴结转移(HR=2.899;95％CI，1.704-4.933;p＜0.001)是结直肠癌患者的独立预后因素。
5.Transwell小室实验表明miR-182能够促进结直肠癌细胞HT-29的迁移能力
HT-29细胞转染miR-182模拟物24小时后，其表达水平较对照组显著升高(p＜0.05）。MiR-182过表达的HT-29细胞迁移数(61±9)显著高于阴性对照组(29±5)(p＜0.05)和空白对照组(27±4)(p＜0.05)。
结论:
1.MiR-182在结直肠癌中高表达，并且与患者的肿瘤大小，局部淋巴结转移和临床分期密切相关，提示其在结直肠癌的发生发展中发挥着重要作用。
2.MiR-182高表达组的生存率显著低于低表达组，并且COX相对危险回归法结果显示miR-182水平是结直肠癌患者独立的预后因素，提示其可作为结直肠癌患者的一个独立的预后分子和潜在治疗靶点。
3.MiR-182在转移性结直肠癌中高表达，且高于非转移结直肠癌，此外其在体外能增强结直肠癌细胞的迁移能力，提示miR-182可作为预防和治疗结直肠癌转移的潜在靶点。