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目的:肺癌是严重威胁人类健康及生命的恶性肿瘤之一,发病率逐年上升,调查结果显示:肺癌发病率及死亡率在全球许多国家已经跃居首位。但目前肺癌的诊断水平仍欠理想,大部分患者发现时已到晚期。治疗效果和生存率都不能令人满意。所以预防和早期发现对提高肺癌患者生存率有重要意义。而且大量研究明确提出:吸烟、环境因素及生活方式与肺癌发病风险有关。近来,随着分子生物学研究水平的不断进展,肺癌遗传易感性的作用逐渐被重视。血管增生是肿瘤发生和发展的重要一步,可以有效促进肿瘤的生长、侵袭和转移。血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)是对血管内皮细胞有高度特异性的有丝分裂原,高浓度的VEGF可有效促进血管内皮细胞生长、分化及迁移,诱导新生血管形成,促进肿瘤组织建立起丰富毛细血管网;并且可增加毛细血管后静脉和小静脉通透性,而且还与肿瘤患者免疫功能低相关。从而在肿瘤形成、生长、侵袭及转移过程中扮演了相当重要的角色,被认为是与肿瘤发生、发展相关的最重要因子之一。近来报道提示:在一些肿瘤性疾病如:乳腺癌,前列腺癌、食管癌、胃癌和肺癌等可以检测到患者血、尿和(或)肿瘤组织内VEGF表达量增加。VEGF基因序列的改变有可能影响到VEGF的表达量和(或)活性,且有研究报道VEGF基因单核苷酸多态性与乳腺癌、前列腺癌、恶性黑色素瘤等易感性相关。所以VEGF基因多态性与肺癌遗传易感性相关性的研究对于其预防及早期诊治有重要意义。但目前国内鲜有VEGF基因多态性与肺癌易感性的相关报道。VEGF基因具有高度多态性,目前至少发现了30多个单核苷酸多态性(SNP)位点。本研究旨在探讨VEGF基因启动子区-460T/C和-1154G/A单核苷酸多态性(single nucleotidepolymorphism,SNP)与中国北方汉族人群肺癌(lung cancer)发病风险的关系。方法:采用基于医院的病例-对照研究方法,采集200例肺癌患者(其中鳞状细胞癌75例、腺癌84例、小细胞肺癌41例)和204例健康对照个体的静脉抗凝血5ml,同时记录其病史和个人相关资料。以蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment lengthpolymorphism,PCR-RFLP)方法和引物介导的限制性聚合酶链反应(primer-introduced restriction analysis PCR,PIRA-PCR)方法检测VEGF -460T/C和VEGF -1154G/A多态性位点的基因型。对照组基因型频率进行Hardy-Weinberg平衡分析。数据统计分析采用SPSS 11.5版软件包(SPSS Company,Chicago,Illinois,USA)进行,P<0.05被认为有统计学意义。患者组与对照组的年龄差异采用t检验。病例组与对照组的基因型、等位基因型分布比较采用行×列表卡方检验。单体型频率及连锁不平衡分析采用EH软件和2LD软件(1.2 version,Rockefeller University,New York)。以非条件Logistic回归法计算经性别、年龄和吸烟状况校正的相对风险度的比值比(oddsratio,OR)及其95%可信区间(confidence interval,CI)。结果:1肺癌组的吸烟者比例(58.0%)明显高于健康对照组的(41.7%),存在显著性差异(X~2=10.777,P=0.001)。提示吸烟可显著增加肺癌发病风险,经性别和年龄校正后的OR=1.933,95%CI=1.302-2.871。2健康对照组中的VEGF -460T/C多态性位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。肺癌患者组VEGF -460 T/C SNP T和C等位基因频率分别为72.5%、27.5%;健康对照组中等位基因频率分别为79.9%、20.1%;肺癌组中C等位基因频率明显高于对照组,两组比较有统计学意义(X~2=6.109,P=0.013)。三种基因型(T/T、T/C、C/C)分布频率:健康对照组分别为63.2%、33.3%、3.4%;肺癌组的基因型频率分别为52.5%、40.0%、7.5%。由于C/C基因型频率较低,遂将T/C与C/C基因型合并。合并后肺癌患者组的T/T、T/C+C/C基因型频率分别为52.2%、47.5%;健康对照组基因型频率分别为63.2%、36.7%。两组间基因型分布有统计学意义(X~2=4.445,P=0.029)。与T/T基因型相比,携带C等位基因(T/C+C/C)的基因型可显著增加肺癌的发病风险。经性别、年龄和吸烟情况校正后OR=1.692,95%CI=1.123-2.549。根据个体吸烟状况进行分层分析发现,与T/T基因型相比,携带C等位基因(T/C+C/C)的基因型可显著增加不吸烟人群的发病风险。经性别和年龄校正后的OR=2.457,95%CI=1.357-4.450。根据肺癌病理类型进行分层分析发现,与T/T基因型相比,携带C等位基因的基因型(T/C+C/C),明显增加肺鳞状细胞癌及小细胞癌发病风险,经性别、年龄和吸烟状况校正后的OR分别是1.867和2.092;95%CI分别是1.058-3.295和1.036-4.224。3健康对照组中的VEGF -1154G/A多态性位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。VEGF -1154G/A基因型和等位基因频率分布在肺癌组与健康对照组之间均无统计学意义(P>0.05)。根据个体吸烟状况分层分析发现,与G/G基因型相比,携带A等位基因的基因型(G/A+A/A),可降低不吸烟个体肺癌的发病风险,经性别和年龄校正后的OR=0.412,95%CI=0.228-0.746。根据肺癌病理类型进行分层分析,未发现VEGF -1154G/A多态性与肺鳞状细胞癌、肺腺癌及小细胞肺癌的发病风险相关。4应用2LD软件对VEGF -1154G/A与VEGF -460T/C多态性位点进行联合分析显示,两多态性位点问不存在连锁不平衡(D’=0.370936)。结论:1吸烟可以明显增加肺癌的发病风险。2 VEGF -460T/C单核苷酸多态性可能与肺癌发病风险相关,进一部病理类型分层分析发现:携带C等位基因(T/C+C/C)的基因型可增加肺鳞状细胞癌及小细胞肺癌发病风险;根据吸烟状况进行分层分析示:携带C等位基因(T/C+C/C)的基因型可增加不吸烟个体肺癌的发病风险。3 VEGF -1154G/A单核苷酸多态性可能与不吸烟个体肺癌发病风险相关。即携带A等位基因的基因型(G/A+A/A),可降低不吸烟个体肺癌的发病风险。