【摘 要】
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根据国外文献发表的SP-AⅠ克隆、SP-A 6A序列,利用PcGENE设计一对引物,并选用特异性引物一条,以正常人肺组织mRNA和染色体DNA为模板,采用RT-PCR、PCR技术,分别得到SP-A 6A
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根据国外文献发表的SP-AⅠ克隆、SP-A 6A序列,利用PcGENE设计一对引物,并选用特异性引物一条,以正常人肺组织mRNA和染色体DNA为模板,采用RT-PCR、PCR技术,分别得到SP-A 6A和SP-AⅠ克隆,测序结果证实所得克隆基因亚型为6A<3>;以已经证实的SP-A 6A克隆为模板,经PCR获得目的片断,与表达载体pWR450-1连接,转入表达宿主菌JM105中表达.SDS-PAGE检测结果显示:重组菌株表达产物小于载体菌株表达产物,提示表达提前终止,说明SP-A 6A有较多大肠杆菌非偏受密码,不适宜在大肠杆菌表达体系中表达.
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