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乳酸菌是一类有益于宿主健康的微生物,主要通过在肠道中的定植发挥益生作用。乳酸菌对肠道上皮细胞的黏附、定植作用有助于恢复或增强肠道稳态,提高机体免疫力。因而乳酸菌的黏附能力是评价其益生性的重要指标。然而,有些具有益生功能的乳酸菌作用效果和稳定性却不尽如人意。所以筛选出一株黏附能力高,又具有免疫调节潜力的乳酸菌,对开发高效的免疫调节益生菌制剂尤为重要。本课题旨在从实验室保藏的12株乳杆菌和2株耐久肠球菌中筛选出高黏附性乳酸菌,并分析影响该菌株黏附性的因素,对黏附机制进行初步探究。最后评价了该株高黏附乳酸菌对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。选取具有良好黏附性能的嗜酸乳杆菌NCFM作为对照,通过对14株不同种乳酸菌进行表面疏水性、自聚集能力以及体外黏附Caco-2细胞能力的测定,筛选出高黏附性乳酸菌菌株。并分析了表面性质与黏附性之间的关系。结果发现嗜酸乳杆菌KLDS 1.0901对Caco-2细胞的黏附率是受试的15株菌中最高的,为12.73%,且KLDS 1.0901具有仅次于耐久肠球菌KLDS6.0933的疏水率,为13.88%。鼠李糖乳杆菌KLDS1.0205的黏附能力最低,为0.13%。不同乳酸菌的表面疏水性与对Caco-2细胞的黏附能力呈现一定的相关性。采用体外实验探究了高黏附性嗜酸乳杆菌KLDS1.0901的浓度、生长阶段、化学和酶处理对其黏附Caco-2细胞能力的影响。试验结果表明,KLDS1.0901的生长阶段显著影响其黏附性。菌体浓度为1081010 CFU/mL时,对黏附性影响不显著。KLDS1.0901对Caco-2细胞的黏附可能是以表层蛋白为主的多种黏附素共同作用的结果。结合透射电镜和SDS-PAGE技术,初步分离、鉴定了KLDS1.0901的表层蛋白。结果表明KLDS1.0901表面具有丰富的绒毛状表层蛋白,含量约为15.6%,分子量大约为43 kDa。并证实表层蛋白粗提物能显著抑制KLDS1.0901对Caco-2的黏附,且浓度越大,抑制作用越强。采用流式细胞术分析了未处理、去除表层蛋白和热致死的KLDS1.0901在小鼠肠道中的定植与分布。结果表明,KLDS1.0901在灌胃前期主要黏附于十二指肠和空肠,后期KLDS1.0901趋向于黏附结肠。而去除表层蛋白和热灭活的KLDS1.0901虽然在第一天能大量黏附于十二指肠,但是只能短暂停留于肠道各部位,随着时间推移,这两组在肠道各部位的黏附量显著减少。从体内证实了KLDS1.0901也能在小鼠肠道内长时间黏附定植,并且其表面的表层蛋白同样能显著影响其在体内的黏附能力。体外探究了高黏附菌株KLDS1.0901对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。测定了不同剂量的未处理KLDS1.0901（LLA）、去除表层蛋白KLDS1.0901（RSLA）和热致死的KLDS1.0901（HKLA）对巨噬细胞增殖能力及吞噬作用的影响;以及刺激巨噬细胞后IL-10和TNF-α分泌水平及其对应mRNA的表达量。试验结果表明:当菌体与巨噬细胞以10:1和1:1共同孵育时,LLA和HKLA组均能显著促进巨噬细胞的增殖,但只有LLA能显著促进巨噬细胞的吞噬活性。在所有浓度下,RSLA组均显著抑制了巨噬细胞活性。并证实KLDS1.0901表面的表层蛋白是增强巨噬细胞活性的重要物质,当以500μg/mL的表层蛋白粗品刺激巨噬细胞时,其增殖和吞噬活性最强。KLDS1.0901与巨噬细胞以1000:1共同孵育时,与空白对照组相比,LLA显著抑制了IL-10和TNF-的分泌。其他浓度条件下:LLA,RSLA和HKLR组IL-10的分泌水平均显著高于对照组,但远低于LPS组;LLA、RSLA和HKLA能够诱导细胞分泌与LPS组相同水平的TNF-α。与空白对照组相比,当菌体与巨噬细胞以100:1共培养时,LLA和HKLA均能显著上调IL-10和TNF-mRNA表达水平。这与细胞因子水平的测定结果相佐证。结论为筛选得到一株表层蛋白含量丰富、黏附性高和具有免疫调节潜力的嗜酸乳杆菌KLDS1.0901。该菌株有作为粘膜疫苗载体使用的潜能,亦可开发成高效调节机体免疫的益生菌。