目的 构建人转化生长因子β₃的真核表达载体pcDNA3.1（一）/TGFβ₃,以及该重组质粒转染NIH3T3成纤维细胞的稳定表达系统,检测TGFβ₃基因在成纤维细胞中的表达和该系统细胞的生长增殖性状。方法 利用重组DNA技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定真核表达载体pcDNA3.1（一）/TGFβ₃。通过脂质体介导的转染技术和G418细胞筛选法,将所构建的重组质粒导入NIH3T3成纤维细胞,构建TGFβ₃转基因NIH3T3成纤维细胞系,应用RT-PCR检测hTGFβ₃在真核细胞中的表达。经四唑蓝比色实 验法（MTT）分别对hTGFβ₃重组质粒稳定表达细胞组、空载体组和NIH3T3对照组进行检测。结果 经琼脂糖凝胶电泳及测序证实,酶切片段与GenBank中登记的TFGFβ₃全长序列相同,pcDNA3.1（一）/TGFβ₃酶切片段的长度与理论大小相符。在10株转染和经G418反复筛选的NIH3T3成纤维细胞系中,有7株hTGF β₃mRNA的表达明显增强,其余3株细胞相对较弱或者没有表达。TGF β₃转基因NIH3T3成纤维细胞系的生长速度下降,以4-5天尤为显著。结论 pcDNA3.1（一）/TGF β₃真核表达载体以及该重组质粒转染NIH3T3成纤维细胞的稳定表达系统构建成功,转基因hTGFβ₃在体外培养条件下可抑制成纤维细胞的增殖,由此推论与展望, 转基因TGF β₃可能对瘢痕增生有较好的抑制作用。