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骨形成蛋白(Bone Morphogenetic Proteins,BMPs)是一种分泌型糖蛋白,具有多种生物学功能。BMP2和BMP4是骨形成蛋白家族中的两个重要成员,在结构和功能上这两种蛋白都非常相似,两者都能够诱导骨组织的生成和造血组织的分化等,但BMP2诱导骨组织形成的活性更强,BMP4则对造血组织的作用更突出。在成体,BMP2诱导异位骨形成,成为用于骨组织工程的重要诱导因子:BMP4则可以促进造血干细胞的增殖,并诱导造血干细胞向红系、粒系和巨噬细胞系三系细胞分化,从而能够促进受损伤的造血系统的全面再生与恢复;这些特性使得BMP2和BMP4都具有很好的临床应用前景。 在BMP的制备过程中,真核表达系统表达量低,表达产物回收、纯化困难、生产成本很高;原核表达系统,特别是大肠杆菌系统,具有表达效率高,容易操作,容易监控,产物稳定,生产成本低等优点,故而我们在进行BMP的大规模制备过程中选择了大肠杆菌表达系统。目前,重组人骨形成蛋白2的大规模制备已有较多报道,本研究的目的,就是应用我们目前已经比较成熟的制备BMP2的工艺,来制备BMP4,来验证大规模制备这两种蛋白时,能否用相同的发酵程序及相近的纯化方法。 两种工程菌株(DH5α/pDH2-BMP-4m及DH5α/pDH2-BMP-2m)分别