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刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是顶复门的一种真核寄生虫，能够感染几乎任何哺乳类和鸟类细胞。微线体(Micronemes)是顶复门寄生虫细胞内的一种细胞器，它可以分泌产生多种微线体蛋白(Microneme proteins，MICs)，由于其在弓形虫侵染宿主的过程中起重要作用而成为潜在的抗弓形虫病的疫苗候选分子。本研究首次对来自不同宿主、基因型和地理株的18个弓形虫样本(包括国际标准强毒株RH株、QHO绵羊株等)的微线体蛋白13(Tgmic13)基因序列进行PCR扩增、克隆、测序和序列分析。结果得到完整的Tgmic13 DNA和cDNA序列分别为2506bp-2507bp和1407bp。通过网络利用BLAST进行同源性搜索，用Clustal X1.81程序对实验获得的和GenBankTM下载的Tgmic13基因序列进行比对，然后用PUZZLE4.1程序分析各个虫株之间的遗传距离。同时利用DNAstar5.0中的Megalign程序进行相似性分析及计算碱基组成、转换、颠换分析。结果显示，18个虫株所具有的1407bp的Tgmic13 cDNA序列与已公布的RH国际标准株长度一致，而其DNA序列由于内含子的缺失出现1个碱基的长度差异。所有样本的Tgmic13基因表现为高度保守，在其cDNA与含内含子的DNA序列中共分别检测到10和21个变异位点，变异率分别为0.71％和0.84％。通过种系发育关系分析表明，Tgmic13基因不能作为一个有效的分子标记来区分弓形虫不同宿主来源，也无法区分基因型和地理株，但可作为分子标记用于弓形虫与其它原虫的种间鉴定。 本研究构建了pVAX-MIC13真核表达质粒，验证其能正常表达后，用PBS稀释到1μg/μL，后腿肌肉注射免疫昆明鼠，并设立空载体pVAX I、PBS和空白(Control)对照组。初次免疫后分别于第2w和第4w各加强免疫一次，测定相应的体液免疫和细胞免疫应答指标，并于三免后第14d，用弓形虫RH株速殖子和PRU株包囊腹腔感染昆明鼠，观察其存活时间和在攻虫后第55天检测PRU包囊株攻击感染的小鼠脑部包囊数量。研究结果显示，pVAX-MIC13 cDNA重组真核表达质粒免疫昆明鼠可有效地诱导产生体液免疫和细胞免疫反应；与其他三个对照组相比，经弓形虫RH株攻击感染后，实验组小鼠存活时间明显延长；而经弓形虫PRU株攻击感染后，实验组小鼠脑内包囊数明显减少。结果表明，pVAX-MIC13 cDNA重组真核表达质粒能够有效地提高昆明鼠抵抗弓形虫感染的能力。本研究将为今后弓形虫疫苗的研制和应用提供一定的理论依据。