bFGF和BDNF对缺血性脑损伤自体NSCs原位诱导及定向分化的影响

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目的:通过不同给药途径(尾静脉、侧脑室、鼻腔)给予等量BFGF和BDNF,观察其对缺血性脑损伤后自体神经干细胞(NSE)的增殖、定向分化的促进作用,明确最佳给药途径。 方法:利用线栓法建立大鼠缺血再灌注模型(MCAO),将84只MCAO模型随机分为四组,空白对照组(A组12只),尾静脉给药组(B组24只),侧脑室给药组(C组24只)鼻腔给药组(D组24只);给药组分别于梗死后24小时通过尾静脉、侧脑室和鼻腔给与相同剂量(10u1)bFGF和:BDNF混合液;选取四个时间点3、7、14、28天对大鼠进行神经功能评分,然后断头取脑、制备组织切片,光镜下观察组织病理改变,观察原位NSCs的增殖及定向分化:用免疫组化法检测BrdU标记增殖细胞,检测Nestin标记增殖的神经干细胞;用免疫荧光双标标法测BrdU/NSEBrdU/GFAP细胞阳性个数,观察内源性神经干细胞的分化情况。 结果:神经功能评分显示给药组优于空白对照组,以鼻腔给药组为著,(P<0.01)差异有统计学意义。BrdU在7天出现增殖高峰,以侧脑室组和鼻腔组增殖最明显,各组间存在差异(P<0.01)。Nestin在7天出现增殖高峰,以侧脑室组和鼻腔组增殖最明显,高于其他组(P<0.01)有统计学意义。BrdLI/NSE阳性细胞数逐渐增高,28天达到最高值,以鼻腔组最高与空白对照组、尾静脉给药组有显著差异(P<0.01)有统计学意义。BrdU/GFAP阳性细胞数以7天最高,给药组优于空白对照组,显著差异(P<0.01)有统计学意义。 结论:缺血性脑损伤后内源性神经干细胞激活,bFGF和BDNF可有明显促进MCAO鼠内源性神经干细胞NSCs的增殖、分化的作用,侧脑室和鼻腔给药在行为学评分及对自体神经干细胞NSCs增殖、分化的作用上明显优于尾静脉给药,鼻腔给药是方便、无创、效果显著的给药方式,为最佳给药方式。
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