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本文应用紫外和荧光光谱法研究了核酸及其前体与荧光探针之间的相互作
用,主要研究内容如下:
1.研究了核酸(ct-DNA、ss-DNA、y-RNA)及其前体核酸碱基(腺嘌呤、
次黄嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、尿嘧啶)核苷(鸟苷、脱氧鸟苷、尿苷、脱氧
尿苷)对电子受体探针10-MEAI的动态与静态荧光淬灭研究发现,其荧
光淬灭速率常数接近扩散控制(1010M-1S-1),说明核酸及其前体基态作为
电子给体与受体探针激发单重态的相互作用具有电子转移(ET)的性质。碱基
淬灭能力大小为:And>Ura>Thy>Cyt>Hxt;核苷淬灭能力大小为:
DGS>GS>DUR>UR;核酸淬灭能力大小为:ct-DNA>y-RNA>ss-DNA。
2.利用紫外吸收和荧光光谱,在恒定温度和pH值条件下研究了10-MEAI
荧光探针与ct-DNA之间的相互作用与机理。实验结果表明,当荧光探针与DNA
结合时,其荧光发生强淬灭,紫外吸收光谱出现减色和红移现象,同时存在明
显的盐效应。不存在10-MEAI时,ct-DNA的熔化温度(Tm)为78℃,而当加
入10-MEAI时,其熔化温度升高到84℃,说明10-MEAI与ct-DNA发生相互作
用后,增强了DNA结构的稳定性。通过三种不同的方法测得它们之间相互作
用时的表观结合常数在(1.4-5.5)×104M-1范围,相互验证了数据的准确性,同
时测得结合点位数为2。综合以上实验数据及现象,证明了荧光探针10-MEAI
与DNA相互作用为平行插入和静电结合混合作用模式,其中前者为主要的作
用模式。