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目的:研究局部亚低温对局灶性脑缺血后大鼠脑组织中钙调神经磷酸酶(CaN)表达的影响,探讨局部亚低温对脑缺血损伤的保护作用机制。
方法:65只Wistar大鼠随机分为对照组、常温组、亚低温组。制备一侧永久性大脑中动脉阻塞(pMCAO)模型。低温组在造模后应用贴敷式局部亚低温治疗仪将病灶侧温度降至33±0.5℃并持续作用4小时,对照组和常温组保持全身温度在37±0.5℃。在缺血后3h、6h、12h、24h、3d、7d取脑,HE染色显示组织细胞形态、评定梗死情况;TUNEL法标记凋亡细胞;并采用SABC法进行免疫组化染色,检测钙调神经磷酸酶(CaN)的表达。
结果:HE染色显示梗死灶在大脑中动脉阻塞侧,主要分布于额顶颞叶,少数亦累及同侧丘脑、基底节。与对照组相比,常温组和低温组在梗死后24小时出现大量凋亡细胞,低温组明显少于常温组。免疫组织化学显示:脑缺血后3h,脑梗死病灶周围区,海马区即出现CaN免疫阳性细胞,在脑缺血6h开始增强,12h-24h达高峰,随即下降,至7d已降至基线水平。局部亚低温组CaN蛋白表达于3h-7d较常温缺血组明显减少。
结论:局部亚低温对脑缺血的保护作用可能是通过抑制脑组织中CaN蛋白表达而实现的。