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目的首先初步探讨视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma, Rb)中基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)的表达,以及其与视网膜母细胞瘤的临床病程,视神经浸润与否的关系。进而研究层粘连蛋白(laminin, LN)对人视网膜母细胞瘤株(Hxo-Rb44)基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9及其mRNA表达的影响。方法1.取41例Rb病人石蜡标本切片,采用免疫组织化学染色方法观察MMP-2和MMP-9在Rb组织中的表达情况。2.在体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株(Hxo-Rb44)内分别加入含0、5、10、20μg/ml LN的无血清RPMI-1640培养基,培养24h后,分别利用免疫组化SP染色法和PT-PCR检测每个实验组Hxo-Rb44表达MMP-2, MMP-9及其mRNA的含量。3.采用HMIAS-2000高清晰彩色医学图文分析系统采集和处理图象,所有数据用均数±标准差( x±s)表示,应用SPSS11.5软件进行统计分析。组间差异比较采用t检验,差异显著水平以P < 0.05为标准。结果1.在41例Rb组织切片中均有MMP-2和MMP-9的表达。有视神经浸润的肿瘤MMP-2和MMP-9表达水平明显高于无视神经浸润的肿瘤(P < 0.001),处于眼外期的肿瘤MMP-2和MMP-9的表达水平明显高于眼内期和青光眼期的肿瘤(P < 0.01)。2.视网膜母细胞瘤细胞经LN刺激后,细胞内MMP-2和MMP-9及其mRNA表达均增加,免疫组化结果显示5、10、20μg/ml LN处理组MMP-2和MMP-9的染色灰度值分别是178.1±11.7、147.9±13.4、114.4±13.6和167.0±15.7、140.3±12.0、104.0±10.6,和对照组相比,P < 0.05,且LN浓度越高,其表达越强。5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml LN处理组的MMP-2/β-actin、MMP-9/β-actin灰度值比值分别是0.181±0.016、0.201±0.021、0.243±0.019和0.254±0.023、0.287±0.020、0.320±0.022,与对照组相比,差异均有显著性意义(P < 0.05),且随着LN浓度增高而增高,呈明显的量效关系。结论1. Rb细胞内有MMP-2和MMP-9的表达。MMP-2和MMP-9的表达水平与视神经浸润和临床分期存在密切的关系,提示其表达水平与该肿瘤的浸润与发展有关。2.证明了LN可诱导视网膜母细胞瘤细胞中表达的MMP-2和MMP-9及其mRNA增加,并呈剂量依赖型。提示LN对视网膜母细胞瘤的侵袭和转移可能具有促进作用。