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表观遗传学是遗传学的重要组成部分。近些年来,核酸修饰成为表观遗传学领域的研究热点。在植物、酵母以及病毒等多个物种中发现存在丰富的核酸修饰。大多数核酸上存在广泛的化学修饰。在植物中核酸修饰具有重要的生物学功能。但在植物中,外界信号是如何调控核酸修饰的仍然不清楚,而光作为植物最重要的外界环境信号之一。因此,我们想探究光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰之间是否存在相互关系。本文对光和6-甲基腺嘌呤核酸修饰进行初步研究,结果如下:
1、分别检测在白光和黑暗条件下的野生型(Columbia-0,Col-0)中m6A整体修饰水平。结果显示:白光条件下的野生型中检测到的m6A信号要明显强于黑暗下的野生型,说明光能够诱导m6A修饰的产生。
2、分别检测在蓝光、红光和远红光处理下野生型和对应的突变体中m6A整体修饰水平的差异。结果显示:只有蓝光受体突变体cry1cry2与蓝光处理下的野生型中所检测到的m6A信号有显著差异,说明蓝光诱导m6A修饰的产生。
3、对拟南芥野生型和突变体fip37-4下胚轴在不同单色光下进行表型观察。结果显示:蓝光对突变体fip37-4下胚轴伸长的抑制作用不明显。
4、成功构建MTA-pGADT7、MTB-pGADT7、FIP37-pGADT7和ALKBH10B-pGADT7酵母双杂载体,通过酵母双杂实验,结果显示:在蓝光下蓝光受体CRY1和FIP37有相互作用。
5、成功鉴定出Atdamt-1突变体植株,对野生型和Atdamt-1突变体进行6mA水平检测,结果显示:野生型中的6mA水平显著强于Atdamt-1突变体植株。
6、成功诱导纯化出AtDAMT-1蛋白。
这些初步研究结果为探究拟南芥中光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰之间的功能关系提供了线索,进一步我们将对光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰分子机制进行研究。
1、分别检测在白光和黑暗条件下的野生型(Columbia-0,Col-0)中m6A整体修饰水平。结果显示:白光条件下的野生型中检测到的m6A信号要明显强于黑暗下的野生型,说明光能够诱导m6A修饰的产生。
2、分别检测在蓝光、红光和远红光处理下野生型和对应的突变体中m6A整体修饰水平的差异。结果显示:只有蓝光受体突变体cry1cry2与蓝光处理下的野生型中所检测到的m6A信号有显著差异,说明蓝光诱导m6A修饰的产生。
3、对拟南芥野生型和突变体fip37-4下胚轴在不同单色光下进行表型观察。结果显示:蓝光对突变体fip37-4下胚轴伸长的抑制作用不明显。
4、成功构建MTA-pGADT7、MTB-pGADT7、FIP37-pGADT7和ALKBH10B-pGADT7酵母双杂载体,通过酵母双杂实验,结果显示:在蓝光下蓝光受体CRY1和FIP37有相互作用。
5、成功鉴定出Atdamt-1突变体植株,对野生型和Atdamt-1突变体进行6mA水平检测,结果显示:野生型中的6mA水平显著强于Atdamt-1突变体植株。
6、成功诱导纯化出AtDAMT-1蛋白。
这些初步研究结果为探究拟南芥中光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰之间的功能关系提供了线索,进一步我们将对光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰分子机制进行研究。