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【研究背景和目的】鼻咽癌是我国常见的恶性肿瘤之一，尤以华南地区发病率最高。由于鼻咽部解剖位置的特殊性以及鼻咽癌细胞对射线较敏感的特点，放射治疗是未转移鼻咽癌患者的首选治疗方式。同步放化疗提高了局部晚期鼻咽癌患者的生存时间，已经成为局部晚期鼻咽癌患者的标准治疗模式[1-2]。临床工作中，一些患者接受了足量的放化疗也出现复发，这通常是由于存在对放疗抗拒的细胞有关[5]。目前放射抗拒机理研究热点在于：对比亲本细胞及其诱导出来的放射抗拒细胞，以高通量实验方法筛选出差异表达基因或者蛋白，经过体外实验进一步验证。但相应的体内实验很少报道。目前已有报道诱导出人鼻咽癌放射抗拒细胞系CNE2R)，本课题组前期也已建立了人鼻咽癌放射抗拒细胞系CNE-2R)，但相应的动物实验模型尚未建立。肿瘤动物模型是研究肿瘤机理和肿瘤防治研究最有用的工具之一。BALB/c-nu裸小鼠先天性胸腺缺乏，适合移植瘤生长，因此裸鼠异种移植瘤模型是肿瘤研究中常用的模型。本研究将诱导出来的放射抗拒细胞移植到动物体内，建立裸鼠移植瘤模型，并用χ射线分次照射移植瘤以检验放射抗拒细胞在体内的放射抗拒性，为解决鼻咽癌放射抗拒问题提供较好的动物模型。本研究进一步探讨前期研究筛选出的几个差异表达蛋白（DEPs）：NPM1蛋白、Annexin A3蛋白和nm23-H1蛋白在不同放射敏感移植瘤组织中的表达，为解决鼻咽癌放射抗拒提供新的标志物，这对于临床上采取更有效的手段以提高鼻咽癌的治疗效果很有必要。【研究方法】1.将鼻咽癌放射抗拒细胞CNE-2R和人鼻咽癌亲本细胞CNE-2注射入裸鼠皮下，建立人鼻咽癌放射抗拒移植瘤模型和人鼻咽癌放射敏感移植瘤模型这一对比模型。2.观察移植瘤生长特性，以χ射线分次照射移植瘤，观察不同放射敏感性移植瘤受照射后生长情况。3.取出移植瘤进行病理学检测，光镜下观察移植瘤细胞形态。4.免疫组化法检测NPM1蛋白、Annexin A3蛋白和nm23-H1蛋白在不同放射敏感性移植瘤组织中的表达，比较其差异。【研究结果】1.建立了人鼻咽癌放射抗拒移植瘤模型（CNE-2R移植瘤）和人鼻咽癌放射敏感移植瘤模型（CNE-2移植瘤）。2.未受照射CNE-2R移植瘤生长速度慢于未受照射CNE-2移植瘤（P<0.01），移植瘤体积倍增时间分别为4.8天、3.9天；CNE-2R移植瘤生长受照射抑制不明显（P>0.05），而CNE-2移植瘤受照射生长明显受抑（P<0.05），移植瘤积倍倍增时间分别为6.2天、17.1天；CNE-2R移植瘤受照射后体积增长率大于CNE-2移植瘤（P<0.01）。3.移植瘤形态大体形态及病理学检查：肉眼见移植瘤呈卵圆形或不规则球形，有薄层假包膜，切面呈鱼肉状。光镜下可见未受照射CNE-2R移植瘤及未受照射CNE-2移植瘤大量坏死灶，受照射CNE-2R移植瘤细胞较少坏死。未坏死的CNE-2移植瘤细胞与CNE-2R移植瘤细胞形态光镜下无明显差别。移植瘤细胞呈巢状分布，呈多角形或卵圆形。核大深染，核圆形、卵圆形，胞浆丰富，可见病理核分裂。移植瘤细胞与人鼻咽低分化鳞癌细胞来源形态学特征一致。4. NPM1蛋白、Annexin A3蛋白在未受照射CNE-2R移植瘤中较在未受照射CNE-2移植瘤中明显低表达，P<0.01；nm23-H1蛋白则明显高表达，P<0.05。AnnexinA3蛋白在受照射CNE-2R移植瘤中较在受照射CNE-2移植瘤中表达明显下调，P<0.01；nm23-H1蛋白表达则明显上调，P<0.01；NPM1蛋白在受照射CNE-2R中较在受照射CNE-2移植瘤中表达稍上调，差异无明显统计学意义，P>0.05。【研究结论】1.成功建立了人鼻咽癌放射抗拒移植瘤模型。2.人鼻咽癌放射抗拒移植瘤生长速度较人鼻咽癌放射敏感移植瘤慢，生长受照射抑制不明显，提示鼻咽癌放射抗拒移植瘤可能通过减慢生长速度获得放射抗拒性。3. NPM1蛋白、Annexin A3蛋白在未受照射CNE-2R移植瘤中较在未受照射CNE-2移植瘤中明显低表达，nm23-H1蛋白明显高表达，与前期体外试验结论一致。提示NPM1蛋白、Annexin A3蛋白和nm23-H1蛋白与鼻咽癌放射抗拒有关，可能作为鼻咽癌放射抗拒新的标志物，但需要临床进一步验证。4. NPM1蛋白、nm23-H1蛋白在受照射CNE-2R移植瘤中较在受照射CNE-2移植瘤中表达上调，可能与照射后细胞DNA损伤修复能力增强有关。