一、目的 研究中药成分川芎嗪对大鼠灌服环孢素A的药动学影响，以及利用在体肠灌流法对其机制进行探讨。 二、方法 1.给药及采样方法 1.1大鼠体内实验 40只雄性SD大鼠按体重进行随机区组设计，等分为4组。试验第1d，每只大鼠灌服环孢素A(10 mg／kg)后，于0，1，2，3，4，6，8，12，24，36和48 h从尾静脉处采血0.2～0.25 mL。然后4组大鼠从试验的第4 d到第8 d进行不同的预处理，即每日分别灌服蒸馏水(0.5 mL，bid，I组)，维拉帕米(10 mg／kg，qd，II组)，低剂量川芎嗪(10 mg／kg，bid，III组)和高剂量川芎嗪(30 mg／kg，bid，Ⅳ组)。第9 d各组大鼠合用环孢素A(10 mg／kg)和上述的不同物质，按第1 d的时间点采样。 1.2大鼠在体肠吸收实验 24只雄性SD大鼠按体重进行随机区组设计，等分为4组，进行以下不同方式的处理：A组：循环灌流液中单加入罗丹明-123；B组：循环灌流液中加入川芎嗪与罗丹明-123；C组：大鼠灌服川芎嗪4 d后，在肠灌流实验的循环液中加入川芎嗪和罗丹明-123；D组：大鼠灌服川芎嗪4 d后，在肠灌流实验的循环液中单加罗丹明．123。大鼠实验前禁食12 h，腹腔注射戊巴比妥(40 mg／mL，0.1 mL／100 g)麻醉，用37℃的生理盐水将肠内容物冲洗干净，自十二指肠上部及回肠下部各插入直径为0.15 cm的玻璃管，与胶管相连通过蠕动泵，用空白循环液平衡20 min后，各组换用含罗丹明-123的循环灌流液或含罗丹明-123和川芎嗪的循环灌流液。此后每隔20 min取样1mL，同时补加空白循环液1 mL。 2.生物样本的测定方法 2.1用HPLC法测定全血中环孢素A的浓度。 2.2用HPLC法同时测定循环灌流液中罗丹明-123和酚红的浓度。 三、结果 1．生物样本测定的方法 环孢素A血药浓度测定 环孢素A在0.04～2.8μg／mL浓度范围内线性良好，r=0.999 2，最低定量限为0.04μg/mL(S／N≥10)。方法回收率为94.2％～98.1％，日间和日内的RSD均小于15％。 在体肠灌流液的测定罗丹明-123和酚红的色谱峰分离良好，且不受循环液中其它杂质的干扰，其线形范围分别为：0.125～1.50 μg/mL和5～50 mg／mL，日内、日间RSD均小于15％。 2．大鼠前、后灌服CsA的主要药动学参数 第1组：大鼠前、后两次灌服CsA的药动学参数分别为：AUC<,o-48>(12.6±6.0μg·h／mL和12.3±4.2μg·h／mL)，AUC<,0-∞>(13.4±6.1μg·h／mL和12.9±4.2μg·h／mL)，C<,max>(0.9±0.3μg／mL和1.0±0.3μg／mL)，t<,l／2>(10.3±1.7 h和9.8±1.4h)，T<,max>(4.14±1.4 h和3.8±0.4 h)，V(8.54±3.2L和8.1±1.5L)，cL(0.60±0.18L／h和0.59±0.15 L／h)。 第1I组：大鼠前、后两次灌服CsA的药动学参数分别为：AUC<,0-48>(11.0±4.7μg·h／mL和21.34±5.0μg·h／mL)，AUC<,0-∞>(11.9±4.7μg·h／mL和22.9±5.0μg·h／mL)，C<,max>(0.8±0.3μg／mL和1.3±0.3μg／mL)，t<,l／2>(10.8±I.1 h和12.2±I.2h)，T<,max>(3.9±I.3hT 4.8±1.0 h)，V(10.7±2.3L和6.2±I.9 L)，CL(0.70±0.19 L／h和0.37±0.15 L／h)。 第III组：大鼠前、后两次灌服CsA的药动学参数分别为：AUC<,0-48>(11.8±3.4μg·h／mL和14.8±2.9 μg·h／mL)，AUC<,1-∞>(12.7±3.4μg·h／mL和15.9±3.0 μg·h／mL)，C<,max>(O.9±0.3μg/mL和1.1±0.2μg／mL)，t<,1／2>(11.6±1.0h和11.1±1.5h)，T<,max>(4.0±I.0h和4.6±1.0 h)，V(8.0±3.4L和6.7±1.8L)，cL(0.50±0.25 L／h和0.43±0.13 L／h)。 第Ⅳ组：大鼠前、后两次灌服CsA的药动学参数分别为：AUC<,0-48>(12.9±3.0μg·h／mL和21.4±4.6 μg·h／mL)，AUC<,0-∞>(13.7±2.8μg·h／mL和22.44±4.4 μg·h／mL)，C<,max>(1.0±0.4μg／mL和1.5±0.5μg/mL)，t<,l／2>(11.5±2.3 h和10.5±2.2 h)，T<,max>(3.6±1.3h和4.1±1.4h)，V(7.2±2.8L和4.0±I.1 L)，CL(0.47±0.27L／h和0.34±0.12 L／h)。 3．预处理及合用各种物质对灌服CsA的药动学影响 合用蒸馏水组(第1组)的CsA药动学参数前后无显著性差异；维拉帕米预处理并合用后(第II组)，AUC<,0-48>、AUC<,0-48>和C<,max>均显著增加(p<0.01)，t<,l／2>显著延长(p<0.01)，CL和V显著降低(p<0.01)，而T<,max>的变化无统计学差异。低剂量川芎嗪预处理并与CsA合用后(第Ⅲ组)，AUC<,0-48>和Cm戕有增加的趋势，但无统计学的差异，其余药动学参数的变化也无统计学的差异。高剂量川芎嗪预处理并与CsA合用后(第Ⅳ组)，ALJC<,0-48>、AUC<,0-∞>和C<,max>均有显著的增加(p<0.01)，V显著降低(p<0.05)，而其他药动学参数的变化无统计学差异。 4．大鼠在体肠试验中罗丹明-123的吸收参数 A组罗丹明-123的小肠吸收速率常数和吸收百分率为(0.2690±0.0480)h<'-1>和(11.77±3.48)％； B组罗丹明-123的小肠吸收速率常数和吸收百分率为(0.3076±0.0599)h<'-1>和(13.48±2.97)％； C组罗丹明-123的小肠吸收速率常数和吸收百分率为(0.3399±0.0424)h<'-1>和(15.73±2.49)％； D组罗丹明-123的小肠吸收速率常数和吸收百分率为(0.2957±0.0523)h<'-1>和(13.62±2.50)％。 5．合用川芎嗪对罗丹明-123吸收的影响 对罗丹明-123的吸收速率常数和吸收百分率进行方差分析，结果A组和C组的吸收速率常数和吸收百分率有显著性差异(P<0.05)，而两个参数在其它各组之间均无显著性差异(p>0.05)。 四、结论 1．高剂量的川芎嗪灌服于大鼠一定时间后，高剂量的川芎嗪与CsA合用能提高CsA的灌服吸收程度，但对CsA的体内消除过程无显著影响。 2．大鼠灌服川芎嗪一段时间后，在肠灌流的循环液中加入川芎嗪能促进P-gp的底物(罗丹明-123)在肠道内的吸收。 3．川芎嗪提高CsA的口服生物利用度的主要机制可能是川芎嗪通过抑制肠道P-gp，促进了CsA的肠道吸收。