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【研究背景与目的】长期慢性应激导致下丘脑-垂体-肾上腺轴（hypothalamic-pituitary-adrenocorti-cal,HPA）轴功能亢进、兴奋性氨基酸（excitatoryaminoacid,EAA）生成过多等，引起氧化应激，诱导海马神经元凋亡，最终引起抑郁、焦虑样等症状出现。如何防止慢性应激所致海马神经的损伤，对防治慢性应激所致精神情感异常具有重要意义。硫化氢（hydrogensulphide,H2S）作为一种新型气体信号分子具有神经调节功能和神经保护作用。本研究拟建立慢性非预期温和型应激（ChronicUnpredictableMildStress，CUMS）模型，探讨H2S对慢性应激导致海马神经损伤的保护作用及其机制。【方法】1.将大鼠随机分为对照组、CUMS组、CUMS+低浓度NaHS（1.68mg/kg）组、CUMS+高浓度NaHS组（5.6mg/kg）；建立慢性非预期温和型应激（ChronicUnpredictableMildStress，CUMS）模型。2.亚甲基蓝法检测海马组织内源性H2S的生成；3.HE染色观察海马CA3区细胞排列情况及细胞形态；4.利用Tunel法检测海马区神经细胞凋亡情况；5.应用Elisa法测海马组织Klotho蛋白表达情况；6.Brdu免疫组织化学染色检测大鼠海马神经元再生。【结果】1.慢性应激四周及腹腔注射NaHS两周后，灌流，固定脑组织，将脑组织进行石蜡切片（5um），进行HE染色，结果显示，CUMS组大鼠海马CA3区细胞较对照组排列紊乱，细胞间隙增大，有神经细胞的缺失；CUMS+低浓度NaHS组、CUMS+高浓度NaHS组海马CA3区较CUMS组细胞排列紧密、整齐，表明外源性H2S能减CUMS引起的神经细胞损伤。2.慢性应激四周及腹腔注射NaHS两周后，灌流，固定脑组织，将脑组织进行石蜡切片（5um），进行Tunel染色，结果显示，CUMS组大鼠海马CA3区凋亡细胞较对照组增多（电镜下凋亡细胞胞核呈深棕色），CUMS+低浓度NaHS组、CUMS+高浓度NaHS组海马CA3区凋亡细胞较CUMS组明显减少，结果表明外源性H2S可抑制CUMS诱导CA3区细胞凋亡。3.慢性应激四周及腹腔注射NaHS两周后，断头取脑组织，分离出海马，对海马组织进行匀浆，制成10％脑组织匀浆。Elisa法测海马Klotho蛋白表达，结果显示，CUMS组Klotho蛋白表达较对照组明显降低，CUMS组经外源性H2S处理后，海马Klotho蛋白表达明显上调，表明CUMS可抑制海马Klotho蛋白的表达，外源性H2S可逆转CUMS对Klotho蛋白表达的下调。4.慢性应激四周及腹腔注射NaHS两周后，断头取脑组织，分离出海马，对海马组织进行匀浆，制成10％脑组织匀浆，亚甲基蓝法检测海马内源性H2S的生成。结果显示CUMS可显著抑制内源性H2S的生成，外源性H2S可逆转CUMS对海马内源性H2S生成的抑制作用。5.慢性应激四周及腹腔注射NaHS两周，并在应激的最后一周腹腔注射Brdu（50㎎/㎏），灌流、固定脑组织后，将脑组织进行石蜡切片（5um），Brdu免疫组织化学染色检测大鼠海马神经元再生。结果显示，CUMS可显著抑制海马神经元再生，NaHS处理组再生细胞较CUMS组明显增多。【结论】硫化氢通过逆转慢性应激对海马Klotho蛋白表达下调、内源性H2S生成减少和神经发生的抑制作用而拮抗慢性应激损伤海马神经。