仙茅多糖及其酶解产物的制备及结构鉴定

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仙茅为石蒜科多年生草本植物仙茅Curculigo orchioides Gaertn根茎,有补肾助阳、益精血、强筋骨和行血消肿的作用,主要用于肾阳不足、虚痨内伤和筋骨疼痛等病症。为仙茅多糖的进一步应用提供理论基础,本文通过对仙茅粗多糖进行分离纯化获得多个多糖组分,并采用多种化学手段和仪器分析方法对多糖的理化性质和结构特征进行研究,具体内容如下:1.通过对仙茅粗多糖进行DEAE-纤维素层析和凝胶柱层析进行分离纯化,共分得到4个多糖组分:XMP-1~XMP-4。并采用凝胶柱层析及凝胶渗透色谱法对得率较高的XMP-1和XMP-2两个多糖组分进行纯度鉴定,结果显示XMP-1为分子量均一分布多糖,XMP-2分子量分布不均一,因此选取XMP-1作为理化性质和结构分析的主要研究对象。2.采用气质联用法(GC-MS)、凝胶渗透色谱法(GPC)、间羟基联苯法、红外光谱仪和紫外光谱分度计等技术手段对XMP-1进行单糖组成分析、相对分子质量测定、定性鉴定和光谱学分析,结果表明:XMP-1是一个由甘露糖,葡萄糖,半乳糖组成的杂多糖,单糖摩尔比为81.2:5.7:1,相对分子质量为3031 Da,不含糖醛酸、核酸、蛋白质、色素的中性多糖。XMP-1具有多糖红外光谱典型吸收特征,其分子中含有β-D-甘露吡喃糖;3.运用部分酸水解、高碘酸-Smith降解、甲基化和刚果红实验等分析方法,对XMP-1的结构特征分析结果如下:XMP-1的主链核心区由这三种甘露糖、葡萄糖、半乳糖这三种糖残基构成;其主链边缘区域和支链主要由甘露糖、葡萄糖组成,支链或主链的末端残基主要由甘露糖、葡萄糖组成。推测XMP-1大致的糖链结构是:以1→3连接的甘露糖、1→2,6位连接的甘露糖、1→3,6位连接的甘露糖、1→4连接的甘露糖、1→4连接的葡萄糖、1→6位连接的半乳糖为主链;以1→位连接的葡萄糖为主链末端残基;以1→2,6位和1→3,6位甘露糖为糖链支点;含少数以1→3连接和1→4连接的甘露糖、1→4连接的葡萄糖为主要连接方式的支链。XMP-1在水溶液中不是以螺旋结构存在,可能为自然卷曲结构。
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