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目的：探讨丹皮酚(Paeonol,Pae)与氟康唑(Fluconazole,FLC)单独和联合应用抗白念珠菌作用及其机制。 方法：1.参照体外药物敏感试验M27-A3方案：⑴通过微量稀释法，检测丹皮酚与氟康唑抗白念珠菌的作用，获得各药物单独抗菌时的最低抑菌浓度(Minimal inhibitory concentrations,MIC)；⑵通过棋盘格法，检测丹皮酚和氟康唑联合时抗白念珠菌的作用，同时获得单药的MIC联（药物联合时，单药的抑菌浓度）及测定部分抑菌浓度(Fractional inhibitory concentration, FIC)及FIC指数(FIC index, FICI)。2.药物单独及其联合作用于白念珠菌：实验组分为：1：对照组；2：丹皮酚400μg/mL；3：氟康唑1μg/mL；4：丹皮酚1600μg/mL；5：氟康唑4μg/mL；6：丹皮酚400μg/mL与氟康唑1μg/mL。⑴参照血清芽管形成试验的方法，观察白念珠菌的芽管形成数量，检测药物单独及其联合对白念珠菌芽管形成的影响。⑵参照白念珠菌对人口腔颊粘膜上皮细胞(Buccal epithelial cells, BEC)粘附试验方法，观察各组药作用后的白念珠菌对上皮细胞的粘附率，检测药物对白念珠菌粘附人口腔粘膜上皮细胞的影响。⑶采用牛血清白蛋白琼脂培养基、卵黄培养基，检测药物对白念珠菌的分泌型天冬氨酸蛋白酶与细胞外磷脂酶活性的影响。⑷通过逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术及凝胶分析软件bandscan5.0，检测各药物组对白念珠菌的SAP2与PLB1两基因的mRNA表达影响。 结果：1.在pH4.0~6.0的RPMI1640培养基、白念珠菌浓度为5.0×103 CFU/mL的条件下：⑴丹皮酚对白念珠菌的MIC值为1600μg/mL；氟康唑对白念珠菌的MIC值为4μg/mL；⑵药物联合时，测得药物联合MIC：丹皮酚(MIC联=400μg/mL)与氟康唑(MIC联=1μg/mL)联合时FICI=0.5。2.药物分别与白念珠菌单独或联合作用后：⑴各组的芽管生成率分别为63.83％、58.33%、51.17%、45.83%、41.33%和39.17%，低于对照组(P<0.05)；且药物联合组的芽管生成率均低于药物单用组(P<0.05)。⑵各实验组的白念珠菌对口腔上皮细胞粘附率分别为100%、96.67%、91.67%、73.00%、65.33%和38.33%，低于对照组(P<0.05或P<0.01)；且药物联合组的粘附率均低于药物单用组(P<0.05)。⑶通过牛血清白蛋白琼脂培养基检测处理后的白念珠菌分泌型天冬氨酸酶活力（Pa值）分别为0.280、0.444、0.474、0.648、0.739和0.877(P<0.05)，且药物联合组的SAP酶活力均低于药物单用组(P<0.05)；通过蛋黄培养基检测处理后的白念珠菌细胞外磷脂酶活力（Pz值）分别为0.248、0.440、0.477、0.660、0.780和0.835(P<0.05)，且药物联合组的PLB酶活力均低于药物单用组(P<0.05)。⑷应用各组药物分别处理的白念珠菌，其总RNA浓度分别为0.523、0.521、0.521、0.521、0.517、0.515μg/μL，总RNA纯度分别为1.887、1.862、1.866、1.860、1.845和1.863，各样本总RNA和纯度间比较无统计学差异(P>0.05)。各样本所提取的细胞总RNA电泳，可见28s、15s和5s三条带，提示RNA完整性较好。①通过RT-PCR技术比较，各实验组白念珠菌的SAP2基因在mRNA的相对表达量水平分别为0.964、0.911、0.866、0.572、0.491和0.421，低于对照组(P<0.05)，且药物联合组均低于药物单用组(P<0.05)。②通过RT-PCR技术比较，各实验组白念珠菌的PLB1基因在mRNA的相对表达量水平分别为：0.961、0.898、0.834、0.552、0.479和0.412，低于对照组(P<0.05)，且药物联合组均低于药物单用组(P<0.05)。 结论：1.丹皮酚和氟康唑单独作用于白念珠菌时，具有明显的生长抑制作用；两药物联合时，FICI=0.5，单药的MIC明显降低，且两种药物联合时具有协同作用，能显著抑制白念珠菌的生长。2.药物联合抗白念珠菌时，比药物单用的抑制作用好，其作用机制表现为：①药物联合应用时，白念珠菌芽管形成能力及对口腔粘膜上皮细胞的粘附能力均明显低于各药物单用组；②白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶与细胞外磷脂酶活性的抑制作用，联合时要优于各药物的单用；③联合时白念珠菌的SAP2、PLB1两种基因mRNA相对表达量，比单用时的表达量低。