青刺果多糖的提取工艺及其对鸡免疫调节作用的研究

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多糖(polysaccharide)是一类天然大分子化合物,存在于动植物和微生物中,为生命物质的组成成分之一。大量药理及临床研究证实,多糖具有抗癌、抗病毒、降血糖、降血脂和免疫调节的作用,是一类重要的生物活性物质,可作为各种药物和保健品的有效成分,对于预防和治疗包括癌症在内的多种疾病都具有巨大的潜力。青刺果(Prinsepia utilis Royle),为蔷薇科扁核木属的一种常绿灌木。其中含有较多活性物质,如黄酮,多糖等,但是有关它的研究很少,而有关青刺果多糖(Prinsepia utilis Roglepolysaccharides,PRP)的系统研究尚未见报道,故本研究从充分利用资源和进一步开发青刺果的角度出发,对青刺果多糖的提取工艺和含量测定及对鸡免疫功能的调节作用进行了研究,并初步探讨了其免疫调节机制。主要研究结果如下:1、采用水提醇沉法通过正交试验研究青刺果多糖的提取工艺,并用紫外分光光度法测定多糖的含量。结果表明青刺果多糖的最佳提取条件为100℃,料液比为1:20,提取时间8小时,乙醇浓度为85%,在此条件下提取的多糖含量为40.64%。2、研究青刺果多糖对鸡血清抗体(IgG、gM和IgA)和血液生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白和钙)的影响。结果表明,与对照组相比,青刺果多糖组,21日龄时,IgM表现为极显著增加(p≤0.01);28日龄时,IgG和IgM表现为显著增加(0.01≤p≤0.05);IgA差异不显著;各项血液生化指标与对照组相比差异均不显著。3、研究青刺果多糖对鸡红细胞及外周血淋巴细胞免疫功能的影响。结果表明,与对照组相比,青刺果多糖组,T淋巴细胞ANAE(Acid-α-naphthalene Acetate Esterase)阳性率在14、21和28日龄均极显著增高;红细胞免疫复合物花环率在21日龄时,显著高于对照组;T淋巴细胞花环率与对照组相比差异不显著但有所升高。4、研究青刺果多糖对鸡免疫器官(法氏囊指数、脾脏指数和胸腺指数)及免疫器官中T淋巴细胞和巨噬细胞的影响。结果表明,与对照组相比,青刺果多糖组,14日龄时,法式囊指数显著增加(0.01<p<0.05);14、21和28日龄时脾脏指数和胸腺指数差异均不显著;与对照组相比,青刺果多糖组免疫器官中的T淋巴细胞和巨噬细胞数显著增加(0.01<p≤0.05)。5、研究青刺果多糖对鸡免疫器官(法氏囊、脾脏和胸腺)组织学和超微结构的影响。结果表明,光镜下,在同一日龄下,青刺果多糖组与对照组相比,脾脏红,白髓分化早而且完全,动脉周围淋巴细胞增多,发育较成熟,脾小体积增大,数量增多;法氏囊组织结构成熟,粘膜平整,皮髓质分界相对早而清楚;胸腺的皮、髓质分化早而明显,皮质厚,胸腺小体数量较多,淋巴细胞排列紧密,体积相对更大。电镜下,青刺果多糖组脾脏中的淋巴细胞形态均一,核仁增多,核染色质边移。
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