肌肉生长抑制素(Myostatin)是TGF-β(Transforming Growth Factor-β)超家族的成员之一。Myostatin主要在骨骼肌中表达，其基因敲除小鼠骨骼肌是野生型小鼠骨骼肌的3倍以上，而其它各组织未有明显变化，因此Myostatin作为骨骼肌生长发育的负调控因子发挥作用。本实验室前期工作发现，Myostatin可以抑制小鼠成肌细胞系C2C12细胞和鸡原代成肌细胞的增殖，并采用DD-PCR的方法在鸡中发现了其下游的一个靶基因C-RZF（其在哺乳动物中的同源基因为RNF13），C-RZF受到Myostatin的正调控，并且在鸡原代成肌细胞中过量表达C-RZF会抑制细胞增殖，对C-RZF的结构域分析发现，它具有一个指环结构域（RING Finger Domain），具有泛素连接酶（E3 Ligase）活性，且可能与肿瘤的转移相关。　　为了在动物整体水平上深入研究RNF13的功能，本课题建立了pTRE-RNF13和骨骼肌特异的pTet-Off-MCK转基因小鼠模型。经过检测pTet-Off-MCK转基因小鼠的基因表达发现，3个链中只有57％的B链小鼠能够表达tTA；pTRE-RNF13转基因小鼠的基因表达还需要进一步的检测。此外，我们采用BAC Retrieve系统得到了RNF13基因条件打靶载体，将用于建立RNF13基因条件打靶的小鼠模型。　　本课题对于Myostatin抑制C2C12细胞增殖的分子机制进行了深入的研究。结果发现，Myostatin通过下调细胞内CyclinD1而抑制细胞增殖，且主要是通过促进其蛋白质的降解而实现的，CyclinD1蛋白水平的降低导致CDK4活性的降低，从而将细胞周期阻滞在G1期；CyclinD1和CDK4的过量表达都可以缓解Myostatin对细胞增殖的抑制作用。本研究初步阐明了Myostatin抑制C2C12细胞增殖的机制，为今后的研究提供了线索。