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银杏酮酯(GBE50)为上海杏灵科技药业股份有限公司独家生产的银杏叶制剂原料药，其在治疗心脑血管疾病方面取得良好疗效。目前质量标准中进行银杏黄酮和银杏内酯的含量测定和致敏成分银杏酸的限量检查，还不足以全面控制产品质量。另一方面，目前国内银杏叶提取物市场混乱，掺假掺杂现象屡见不鲜，临床用药安全性难以保障。本文拟建立银杏酮酯中黄酮类成分的指纹图谱及多成分含量测定方法，为提高银杏酮酯及其制剂的质量标准提供实验依据。 1、银杏酮酯黄酮类成分定性分析 采用UPLC/ESI-QTOF-MS结合MSE技术对银杏酮酯中化学成分进行了定性分析。共鉴定了117种化学成分，包括有机酸类化合物8个;黄酮及黄酮醇苷类78个，黄酮醇类9个，双黄酮类13个，黄烷醇类5个，黄酮类3个，异黄酮1个，其中24个化合物经过对照品确认，其他成分通过高分辨数据、二级质谱碎片信息与文献及公共在线数据库进行比对鉴定。利用所建方法对银杏酮酯与银杏叶对照提取物进行差异性分析，以response＞105为指标发现银杏酮酯含有更多双黄酮及黄酮醇苷类化合物，银杏叶对照提取物在黄烷醇类成分中含量具有明显优势，图谱出峰行为也具有明显差异。 2、银杏酮酯及其制剂黄酮类成分指纹图谱检测 利用HPLC-DAD方法，通过对色谱条件及供试品溶液制备方法各因素的考察，建立了银杏酮酯及其制剂黄酮类成分的指纹图谱，指纹图谱方法学考察结果均能达到标准且图谱间相似度良好，表明该方法合理、稳定，可以作为银杏酮酯指纹图谱检测方法。同时对得到的47个共有峰进行化学成分指认，通过UPLC/QTOF-MS结合MSE技术获得41个色谱峰的成分信息。利用所建方法对银杏酮酯及其制剂进行相似度检测，结果表明所建方法为提高银杏酮酯及其制剂质量标准及均一性提供了分析手段。 3、银杏酮酯及其制剂黄酮类化合物多成分含量测定 对银杏酮酯中芦丁、槲皮素、山柰素及异鼠李素进行含量测定并进行了方法学考察。多成分含量测定结果表明:以相当于50mg银杏酮酯计，银杏酮酯中芦丁平均含量0.97rag、槲皮素平均含量0.08mg、山柰素平均含量0.06mg、异鼠李素平均含量0.03mg。制剂中芦丁含量范围为0.94mg-1.09rag、槲皮素含量范围为0.07mg-0.23mg、山柰素含量范围为0.06mg-0.14mg、异鼠李素含量范围为0.03mg-0.06mg，从上述数据可以看出部分样品中的槲皮素、山柰素含量明显高于银杏酮酯，可能存在添加行为。以游离黄酮的含量测定作为评价指标可明显加强对该行为的监测。 综上，本文建立了银杏酮酯中黄酮类成分的指纹图谱及多成分含量测定方法，两种方法各有所长，相互补充，可较好的控制银杏酮酯中黄酮类成分的质量。