我国牛肝菌目包含的种类较为丰富,文献报道的种类有400多种。牛肝菌不仅具有重要的生态价值,还具有极高的食用价值和药用价值。作为野生食用菌资源最为丰富地区之一的云南,牛肝菌是极具出口创汇的野生食用菌之一。在自然状况下,绝大多数牛肝菌与森林植物形成外生菌根共生体,在这种共生关系中,植物为真菌提供碳水化合物,而真菌为植物生长提供矿质元素和水分,其中,磷元素就是最为重要的元素；然而,在人工培养条件下,这类共生真菌很难形成子实体,其开发利用受到了限制。因此,开展牛肝菌菌种分离培养、培养条件的优化和共生机制的研究成为国内外众多学者关注的课题。本研究以云南常见的8株可食用牛肝菌为材料,从子实体中分离培养相应的菌株,并做继代培养,以核糖体基因内转录区基因为分子标记,对所分离到的菌株和相应的子实体进行了分子鉴定；在此基础上,选取一株分离自广义美味牛肝菌(Boletus edulis s.l.)的菌株为代表,对其培养条件进行了初步优化研究,进一步从中克隆到了磷酸盐转运蛋白基因。取得的主要结果如下：1.采用组织分离方法从市售牛肝菌子实体分离得到了8株性状稳定的分离株,利用ITS区测序分析,对所得到的8株菌及其对应的子实体进行了分子鉴定,结果8株菌菌丝体ITS序列与其对应子实体较一致,系统发育分析表明这8株菌分别属于牛肝菌属、疣柄牛肝菌属和牛肝菌科中某一种的牛肝菌；2.以分离自广义美味牛肝菌的菌株WD-4-9菌株为代表菌株,对其培养条件进行初步研究,发现该菌株的最适生长pH值是5,温度是28℃,最佳的碳、氮、磷源分别是麦芽糖、氯化铵和磷酸二氢钾,利用正交试验设计,找到了适合WD-4-9生长的最佳的碳、氮、磷源组合,即麦芽糖、氯化铵和次亚磷酸钠组合；3.采用同源克隆的方法从WD-4-9菌株总DNA中获取了磷酸盐转运蛋白基因的一段保守区序列,进一步采用染色体步移法(Genome Walking)和RACE技术克隆得到了该基因的DNA全长序列和cDNA开放阅读框(ORF)全长序列。利用生物信息学的手段对此蛋白的理化性质和二级结构进行了初步的预测分析,同时进行了同源性和系统发育分析。上述研究结果表明,常规的组织分离培养方法是一种有效从牛肝菌子实体中分离牛肝菌的方法,分子鉴定技术能快速有效地对牛肝菌分离物和子实体进行鉴定；从广义美味牛肝菌分离到的菌株,在纯培养条件下,最适于其生长利用的C,N和P源分别是麦芽糖、氯化铵和磷酸二氢钾；从广义美味牛肝菌分离菌株中克隆到的磷酸盐转运基因及其编码的蛋白分析看,该基因属于MFS超家族中的磷酸盐转运蛋白,可能在真菌与植物的P交换中取着重要作用。