石榴皮多酚的超高压提取、组分分离及其功能性研究

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石榴(Punica granarum L)是一种我国资源丰富的药食两用植物。现代研究表明,石榴多酚含量丰富且具有多种生理功能,它主要存在于石榴皮中,所以开发石榴皮多酚具有重要意义。本研究以陕西临潼主栽的净皮甜石榴皮为试材,首先优化了超高压提取工艺,并对石榴皮多酚组分进行了分离和纯化,在此基础上进行了抗氧化和抑菌活性研究,得到如下结果:(1)单因素试验和二次回归正交旋转组合试验表明:影响超高压提取石榴皮多酚提取效果的条件因素的主次顺序为:料液比>压力>乙醇浓度>保压时间;最佳提取条件为:提取压力582.7MPa,保压时间2.3min,料液比1:41,乙醇浓度52.8%,在此条件下石榴皮多酚的提取得率超过26%;与超声波提取和热回流提取方法相比,超高压提取具有提取率高、粗提物纯度较高、提取时间短的优点。(2)石榴皮多酚提取物的大孔树脂纯化、Sephadex LH-20和有机溶剂分级结果表明:①大孔树脂纯化不改变提取物的多酚组成,可使提取物的多酚含量增加到77.40%;HPLC测定结果显示,石榴皮超高压提取物各成分的含量排序为:安石榴苷>原儿茶酸>儿茶素>鞣花酸>没食子酸,绿原酸、咖啡酸和阿魏酸未能检出;与其它提取技术相比,超高压提取物中安石榴苷和儿茶素的含量显著较高。②Sephadex LH-20能有效分离超高压粗提物中的多酚类物质,不同分离组分间的多酚组成具有显著差异,其中一种分离组分中的安石榴苷含量很高。③有机溶剂萃取分离后,正丁醇相的萃取得率达到了 60%左右;各相萃取物中多酚含量的排序为:正丁醇相>乙酸乙酯相>水相;不同提取方法所得提取物间的有机溶剂萃取分离效果间无显著差异。(3)对不同提取方法所得粗提物、大孔树脂纯化物及不同溶剂萃取物的体外抗氧化能力测定结果表明:不同提取方法所得提取物的抗氧化能力差异不显著,抗氧化能力大小顺序为PCE>SCE>TCE,与总酚含量大小顺序一致;大孔树脂纯化后总抗氧化能力约提高1倍;采用有机溶剂萃取能将石榴皮多酚根据极性有效分离,不同萃取物的抗氧化活性强弱顺序为:EaP>NbP>WtP。(4)对不同样品的抑菌活性的研究结果表明:石榴皮多酚超高压粗提物对金黄色葡萄球菌具有很好的抑菌活性,当粗提物浓度为10mg/mL时,抑菌圈直径达到了15.93mm;不同环境条件对样品的抑菌活性有一定影响,其中pH影响显著,温度和紫外照射影响较小;不同方法提取物抑菌活性差异较小,大孔树脂纯化能有效提高其抑菌活性,有机溶剂萃取分级后不同极性组分间抑菌活性有一定差异,其中正丁醇相的抑菌活性高于其它两相。
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