姜黄素对小鼠巨噬细胞Thrombospondin-4表达的影响

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目的研究姜黄素对小鼠巨噬细胞ANA-1凝血栓素-4(Thrombospondin-4,THBS-4)表达的影响,探讨姜黄素的抗动脉粥样硬化的机理。方法制备oxLDL,用oxLDL处理巨噬细胞。实验分为五组:空白对照组,模型组(20μg/ml oxLDL),姜黄素低剂量组(20gg/ml oxLDL和5μmol/Lcurcumin),姜黄素中剂量组(20μg/ml oxLDL和15μmol/Lcurcumin),姜黄素高剂量组(20μg/mloxLDL和25μmol/Lcurcumin)。通过MTT法检测细胞的活度。培养细胞24小时后,提取细胞总RNA和蛋白,分别采用实时荧光定量PCR法分析THBS-4mRNA的表达和Western Blot法分析THBS-4蛋白的表达。结果①MTT分析显示巨噬细胞在姜黄素0~25μmol/L浓度范围内细胞增殖活力无显著性差异。②实时荧光定量PCR实验分析显示模型组THBS-4mRNA的表达降低了89.12%与正常对照组相比,然而与模型组相比,姜黄素低剂量组、中剂量组和高剂量组THBS-4mRNA的表达分别提高了32.26%、162.08%和1375.70%(p<0.05或p<0.001)。③进一步的Western Blot实验分析证实了姜黄素可剂量依赖性地阻止oxLDL诱导小鼠巨噬细胞ANA-1THBS-4蛋白表达的下调(p<0.05或p<0.001)。结论姜黄素能阻止oxLDL诱导小鼠巨噬细胞ANA-1THBS-4mRNA、THBS-4蛋白表达的下调,这可能是其具抗动脉粥样硬化作用的机制之一。
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