杉木粉对塔玛亚历山大藻生长的抑制作用及其机理研究

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目的:近年来,我国海域有害赤潮(HABs)发生的频次明显增加,对海洋生态环境、水产养殖、旅游和人类健康构成了严重威胁。因此,如何有效防治赤潮一直是人们关注的热点问题。化感作用的发现为寻找新型、廉价、高效、安全的抑藻方法提供了一种新思路。本文以塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)为材料,拟通过具显著抑藻活性的木粉的筛选,所筛选木粉(杉木粉)抑藻机制和化学基础的研究以及木粉的安全性评价等,为利用木粉进行赤潮的治理提供参考,为筛选新的、可迅速去除赤潮藻的、低毒或无毒除藻剂提供思路和方法。 方法:利用倒置显微镜结合细胞计数法观察木粉对塔玛亚历山大藻生长的影响;用普鲁士蓝法测木粉的总酚含量;采用水蒸气蒸馏法提取木粉中的精油;用GC-MS进行杉木精油、杉木粉丙酮-水提物及杉木粉水提物的成分分析,显微镜下观察杉木精油对藻细胞表面结构的影响;以斑马鱼、卤虫为实验材料,对杉木粉的生态安全性进行初步评价。 结果:杉木粉对塔玛亚历山大藻生长的抑制作用明显强于松木粉、桦木粉及恺木粉等,0.2 g/L杉木粉对藻密度为2.88、6.08、14.13×10~6cells/mL的塔玛亚历山大藻均可产生明显的抑制作用,0.5 g/L杉木粉对藻细胞有杀灭作用。灭菌与非灭菌杉木粉对塔玛亚历山大藻生长的抑制作用无明显差别,提示细菌等微生物没有参与抑藻过程。杉木粉的沉降实验表明,杉木粉的对藻细胞的沉降有一定的沉降作用。杉木粉水浸液及丙酮-水提取物均可抑制藻的生长,木粉中总酚含量与抑藻活性并不一致,提示酚酸类物质并非杉木粉抑藻的主要化学基础;杉木粉的丙酮-水提取物对塔玛亚历山大藻细胞的生长有一定影响;但木粉中总酚含量与抑藻活性并不一致,提示酚酸类物质并非杉木粉抑藻的主要化学基础;不同木粉中的精油抑藻活性有显著差别,其中杉木精油的抑藻活性最强,5.0×10~4g/L杉木精油即可有效控制藻的生长。杉木精油可使塔玛亚历山大藻细胞丧失游动性、脱壳、颜色变浅,并造成原生质体破裂,最终导致细胞裂解。杉木精油对塔玛亚历山大藻、海洋褐胞藻(Chattonella marina)、赤潮异湾藻(Heterosigmn akasaiwo)、东海原甲藻(Prorocentrum donghai)及球形棕囊藻(Phaeocystis globosa)的细胞结构等有不同程度的影响,其中塔玛亚历山大藻对杉木精油最敏
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