本课题用新型交联剂-三羟甲基磷(THP)固定α-葡萄糖苷酶，详细研究了固定化的最佳条件和该固定化酶的物理化学性质。该固定化α-葡萄糖苷酶的活性高，是用交联剂-戊二醛固定该酶活性的9倍；在游离酶的最适pH条件下该固定化酶活性回收率为41.2％(若在固定化酶最适pH，回收率在60％以上)；另外该固定化酶的酸碱稳定性、耐有机溶剂性、热稳定性以及贮存稳定性都很高，这为课题后面的药物筛选提供了可能，增大了药物筛选的物质范围，使筛选的物质既可以是酸性物质，也可以是碱性物质，既可以是水溶性物质，也可以是醇溶性物质。另外该固定化方法为该酶的工业化应用提供了可能。 本课题把固定化α-葡萄糖苷酶设计为筛选模型对天然药物进行筛选，该方法是模拟α-葡萄糖苷酶在体内小肠壁上的情况，突破了用传统游离酶筛选的方法。在实验中，该筛选模型成功地对天然药物-虎杖水提物和广西血竭进行了筛选。与传统方法相比，该筛选方法要更准确、更有效和更便利，而且易于操作，可以重复使用，适合大规模筛选含有α-葡萄糖苷酶抑制成分的天然药物。另外该模型还可以直接在体外评价抑制剂的作用效果，研究一些已知能够治疗糖尿病天然药物的作用机理。 本课题用固定化α-葡萄糖苷酶膜对中药血竭进行了亲和筛选，经用HPLC分析，确定保留时间为11.187、5.695、4.340、3.178、2.564、2.309min的物质是有活性的。该方法可以尽量减少由于抑制剂在天然药物中的量少而漏筛，而且灵敏、便捷，另外通过比较该筛选方法所得到的一些抑制剂来获得构效关系信息，为进一步的药学研究打下基础(如先导化合物和候选药物的确定)，该方法还具有快速，适用大规模筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的特点。 本课题的亲和筛选和分离的样品是经过预处理的广西血竭，即乙酸乙酯萃取部位。目标化合物的分离是在亲和筛选结果的指导下进行的，称为活性导向分离(bio-activityguidedisolation)。对目标活性化合物的分离操作整合了多种分离技术，包括硅胶柱柱层析、Flash快速分离色谱、高效液相制备色谱和重结晶方法。这种先筛选后分离的策略和在活性及指纹图谱指导下的导向分离方法，与过去先分离后筛选的方法是不同的，过去的这种先分离后筛选的方法具有盲目性，大量的时间、人力和财力可能花在无活性成分的分离上，而本课题所采用的方法只是针对某一活性部位或成分进行分离，在活性和指纹图谱指导下能较快分离得到活性成分。 本课题通过分离得到一个目标活性化合物，其活性比血竭全粉有很大提高，IC50为0.276μg/mL，它是一个竞争性抑制剂。借助紫外、红外、质谱和核磁共振等仪器分析手段以及定性实验研究，可判断该目标化合物为黄酮类化合物。经查阅大量国内外文献资料，发现该化合物为一种新型的未知物质。