【摘 要】
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木质素是地球上第二大类含量丰富的有机物,其含量仅次于纤维素,对植物的正常生长发育起着重要的生物功能.但是它也有不利的影响,如对造纸制浆工业来说,用常规的化学方法来去
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木质素是地球上第二大类含量丰富的有机物,其含量仅次于纤维素,对植物的正常生长发育起着重要的生物功能.但是它也有不利的影响,如对造纸制浆工业来说,用常规的化学方法来去除木质素的过程既昂贵又造成严重的污染,对作物饲料的质量也有不良影响.因此,通过基因工程的手段来改变木质素的含量和组成将会带来巨大的经济利益.4-香豆素辅酶A-连接酶是木质素合成途径中的调控酶,决定木质素合成中最后一步的反应.该论文首先对烟草、741毛白杨、刺槐、匈牙利四位体刺槐及金叶欧洲山梅花的组培快繁及再生体系进行了研究.在此基础上,利用农杆菌浸染法,将35S-4CL1基因、35S-反义4CL1融合基因、GRP1.8p-4CL1融合基因、4CL1p-4CL1融合基因分别导入烟草、741毛白杨、刺槐、匈牙利四倍体刺槐.通过分析经PCR、Southern杂交验证和筛选的转基因烟草移载苗的木质素、纤维素含量及酶活性发现,与空白植株相比,反义转基因烟草植株中木质素含量平均下降了19.1%,纤维素含量平均上升了11.4%,转基因烟草的酶活性均有明显下降;而正义转基因烟草植株中的木质素含量则比空白的升高了38%、纤维素含量则比空白下降了23%.经抗生素筛选,已初步获得毛白杨、刺槐及匈牙利四倍体刺槐转基因苗.
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