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目的研究体外大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对肝星状细胞(HSCs)RhoA信号因子及其细胞周期调控因子p27表达的影响,探讨MSCs调控HSCs细胞周期G1/S转换机制。方法贴壁筛选法培养、纯化SD大鼠MSCs,传代至第4代使用;大鼠肝星状细胞(HSC-T6)系及纤维原细胞系冻融后传代使用。应用6孔塑料细胞培养盒,每孔使用半透膜(transwell insert)建立上下双层细胞共培养体系,常规培养。实验分3组:空白对照组;阴性对照组;MSCs实验组.用WST-8法对肝星状细胞增殖率进行测定;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR、Western blot检测MSCs与HSCs共培养后HSCs内RhoA,p27 mRNA和蛋白的表达。结果(1) HSCs与MSCs共培养24h后,HSCs表现明显增殖抑制(P<0.01),且呈现时间依赖性.MSCs试验组与空白对照组、阴性对照组比较均有显著性差异(P<0.01;P<0.01)。(2)共培养12h后,MSCs可阻滞HSCs由G0/G1期向S期转换,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,与空白对照组、阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)共培养12h后,MSCs实验组RhoA mRNA表达与空白对照组、阴性对照组比较均有统计学差异(P<0.05;P<0.01),随时间的延长呈递减趋势;共培养后,MSCs实验组p27 mRNA表达与空白对照组、阴性对照组比较均无统计学差异。(4)共培养12h后,MSCs实验组RhoA蛋白表达与空白对照组、阴性对照组比较均有统计学差异(P<0.01,P<0.01),随时间的延长呈递减趋势;共培养12h后, MSCs实验组p27蛋白与空白对照组、阴性对照组比较均有统计学差异(P<0.01;P<0.01),随时间的延长呈递增趋势。(5)相关性分析显示: RhoA与p27 mRNA的表达无明显相关( r=-0.105);RhoA与p27蛋白的表达呈显著负相关( r=-0.943, P<0.01)。结论骨髓间充质干细胞抑制肝星状细胞增殖的机制可能是通过RhoA-p27通路调控HSCs细胞周期改变;RhoA活性的下调可能是引起HSCs内p27蛋白表达增加的原因。