Dyrk1B在卵巢癌组织和细胞中的表达及意义

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目的:检测Dyrk1B在卵巢癌组织和细胞系中的表达,并使用Dyrk1B抑制剂AZ191干预卵巢癌细胞,观察其对卵巢癌细胞的增殖、凋亡及Dyrk1B蛋白表达的影响,以探讨Dyrk1B在卵巢癌发生、发展中的作用及意义。方法:(1)蛋白印迹法检测多种卵巢癌细胞中Dyrk1B蛋白的表达,并检测Dyrk1B抑制剂AZ191对卵巢癌细胞Dyrk1B蛋白表达的影响;(2)MTT比色法检测AZ191对OV2008、C13、A2780S和A2780CP细胞增殖活性的影响;(2)流式细胞术检测AZ191对OV2008、C13、A2780S和A2780CP细胞凋亡的影响;(4)免疫组化法检测Dyrk1B蛋白在卵巢癌组织中的表达。结果:(1)卵巢癌细胞Dyrk1B蛋白表达:A2780S、A2780CP、OV2008、C13、SKOV3、OVCAR3、OVCAR4、OVCAR5和OVCAR8细胞中普遍表达Dyrk1B蛋白,加入Dyrk1B抑制剂AZ191后,OV2008、A2780CP细胞Dyrk1B蛋白表达水平均明显降低;(2)AZ191作用卵巢癌细胞后生长抑制率的比较:MTT比色法检测显示,不同浓度(1、5、10、25μM)Dyrk1B抑制剂AZ191干预OV2008、C13、A2780S和A2780CP细胞48h后,实验组细胞生长抑制率随着抑制剂浓度增加而增大,差异具有统计学意义(P<0.05);(3)AZ191作用卵巢癌细胞后细胞凋亡率的变化:5μM、10μM AZ191干预OV2008、C13、A2780S和A2780CP细胞,四种细胞凋亡倍数(实验组凋亡率/对照组凋亡率)均随抑制剂浓度的增加而增高;(4)免疫组化检测Dyrk1B在119例卵巢癌临床标本中的表达,包括浆液性癌77例、粘液性癌17例、子宫内膜样癌15例、透明细胞癌10例,并以19例正常卵巢组织作为对照,结果发现Dyrk1B在卵巢癌组织中呈高表达,表达率为90.8%(108/119),而在正常卵巢组织中Dyrk1B的表达率仅为15.7%(3/19),二者相比较差异有统计学意义(P=0.000);卵巢癌组织中Dyrk1B的表达与手术病理分期、病理分化程度无明显相关(P均>0.05)。结论:Dyrk1B在卵巢癌组织和细胞中均有表达,Dyrk1B抑制剂AZ191对各种人卵巢癌细胞株(OV2008、C13、A2780S和A2780CP)的增殖均有明显抑制作用,AZ191在下调卵巢癌细胞Dyrk1B蛋白表达同时诱导其发生凋亡。研究结果提示Dyrk1B可能在卵巢癌的发生发展中起关键作用,临床上可能成为卵巢癌分子靶向治疗的新靶点。
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