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本研究分为二部分： 第一部分、急性心肌梗死模型的复制 目的:对大鼠心肌梗死模型建立的讨论。 方法:将75只PDF级SD大鼠随机分为假手术组10只、常规模型组65只,将模型组大鼠麻醉后固定在鼠台上,用多导生理仪与大鼠连接后记录肢导心电图,经口气管插管后连接小动物呼吸机,将大鼠胸腔打开显露心脏,在左心耳与肺动脉圆椎之间距主动脉起点2~3mm处,以左冠状静脉为标志,结扎冠状动脉左前降支;假手术组用上述方法开胸显露心脏,但是只做穿线工作,一个月后查看动物存活率、苏木素一伊红(HE)染色光镜下观察心肌组织病理变化、Western-Blot方法检测梗死心肌eNOS,P-AKT蛋白表达。 结果:模型组动物成活率65％,病理切片可见缺血梗死区的心肌细胞排列不齐,肌细胞数量减少,细胞核大小不甚规则,细胞分界不清楚;梗死区心肌及梗死心肌边缘区p-AKT、p-eNOS蛋白表达水平显著增加。 结论:此方法制备动物模型简单易得,且动物存活率比较高,对于研究大鼠心肌梗死模型血管新生的蛋白表达起到了积极作用。 第二部分、安心颗粒诱导大鼠心肌梗死模型血管新生的蛋白表达的研究 目的:对安心颗粒诱导大鼠心肌梗死模型血管新生蛋白表达的研究。 方法:将造模用的65只SD大鼠随机分成6组,每组10只,留5只作为备用。标记为假手术组、生理盐水组、麝香保心丸组、安心颗粒小、中、大剂量组,用3％戊巴比妥钠(0.1ml/100g)将大鼠麻醉后固定于鼠台,将其与多导生理仪连接以便于记录肢体导联心电图,行气管插管术后连接动物呼吸机,在大鼠左胸第4~5肋处开胸显露心脏,在左心耳与肺动脉圆椎之间距主动脉起点2~3mm处,以左冠状静脉为标志,结扎冠状动脉左前降支制备大鼠心肌梗死模型,假手术组用上述方法开胸显露心脏后,只做穿线工作。术后当天始每天注射青霉素针1次(20万u/100g体重)预防感染,共3天。灌胃8周后,查看动物存活率,用HE染色和免疫组化观察安心颗粒对实验动物心肌梗死边缘区心肌微血管数(MVC)、微血管密度(MVD)的影响;Wstern-Blotting测定安心颗粒对实验动物心肌P-eNOS,p-akt蛋白表达水平。 结果:安心颗粒各剂量组与麝香保心丸组及对照组相比较,其心肌梗死边缘区的平均微血管数(MVC)、平均微血管密度(MVD)均明显增多,差异存在统计学意义(P<0.05或P<0.01);安心颗粒各剂量组和对照组和麝香保心丸组相比较,梗死区心肌 eNOS,P-AKT蛋白表达均明显增加,差异存在统计学意义(P<0.05或P<0.01);安心颗粒各剂量组之间进行对照,其心肌梗死区平均微血管数(MVC)、平均微血管密度(MVD)和心肌eNOS,P-AKT蛋白表达作用相似,差异没有统计学意义(P﹥0.05)。 结论:安心颗粒对大鼠心肌梗死模型血管新生的蛋白表达有一定的诱导作用,这种诱导作用可能是通过VEGF-PI3K-AKT-NO信号转导通路来实现的。