【摘 要】
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目的:通过用DNA甲基化抑制剂5-氮杂脱氧胞苷诱导乳兔软骨细胞凋亡,探讨DNA低甲基化在骨关节炎发病机制中的作用。方法:第一代乳兔软骨细胞随机分为对照组,5-氮杂脱氧胞苷处理
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目的:通过用DNA甲基化抑制剂5-氮杂脱氧胞苷诱导乳兔软骨细胞凋亡,探讨DNA低甲基化在骨关节炎发病机制中的作用。方法:第一代乳兔软骨细胞随机分为对照组,5-氮杂脱氧胞苷处理组,分别培养3天。采用MTT法检测细胞存活率,电镜观察5-氮杂脱氧胞苷致软骨细胞凋亡的作用,硝酸还原酶法(NO试剂盒)测定5-氮杂脱氧胞苷作用于软骨细胞培养基上清液中NO含量,免疫印记法(Western Blotting)检测5-氮杂脱氧胞苷对软骨细胞表达一氧化氮合酶(iNOS)和Fas蛋白的影响。SPSS软件统计分析5-氮杂脱氧胞苷诱导软骨细胞凋亡与其分泌NO、iNOS和Fas蛋白的相关性。结果:1.随5-氮杂脱氧胞苷浓度增加和作用时间延长,软骨细胞存活率下降,并呈浓度及时间依赖关系(p＜0.05)。2.5-氮杂脱氧胞苷可引起软骨细胞发生凋亡的典型电镜形态改变。3.5-氮杂脱氧胞苷可刺激软骨细胞分泌NO(p＜0.05)。4.5-氮杂脱氧胞苷可使凋亡相关蛋白iNOS蛋白表达增多(p＜0.05),但不能使Fas蛋白表达增多(p＞0.10)。5.5-氮杂脱氧胞苷诱导软骨细胞的凋亡与软骨细胞分泌NO和表达iNOS蛋白正相关性(p＜0.05);与Fas蛋白的表达没有明显相关性(p＞0.10)。结论:DNA低甲基化可通过NO途径诱导兔软骨细胞凋亡。
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