低强度脉冲超声波抑制兔下颌骨多孔钛合金支架破骨作用的研究

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目的:以往的研究证明了低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)可以通过提高体内外成骨细胞的活性和成骨分化功能,促进Ti6Al4V三维支架材料内成骨作用。破骨细胞在骨组织愈合中也发挥着至关重要的作用,但LIPUS在骨组织愈合中对破骨作用的影响尚不清楚。因此本研究建立兔下颌骨大面积骨缺损模型,植入Ti6Al4V三维支架材料,探索LIPUS对骨愈合过程中破骨作用的影响。研究方法:(1)建立下颌骨大面积骨缺损模型,并植入Ti6Al4V材料。(2)分组:将24只新西兰大白兔双侧下颌骨均植入Ti6AL4V材料,12只双侧均加载LIPUS,即LIPUS组,12只双侧进行假辐照,即对照组,分别在3周、6周、9周和12周后取材。(3)Micro-CT检查:将3周、6周、9周和12周取材的样本进行Micro-CT检测,并计算成骨相关参数:BV/TV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp值。(4)荧光染色:分别在取材前14天和7天向动物体内注射钙黄绿素和二甲酚橙,取材后制作硬组织切片,并计算骨矿化沉积率。(5)Von Kossa-VG染色:硬组织切片用Von Kossa-VG进行染色,并计算成骨面积。(6)实时定量PCR:检测破骨相关基因的表达水平:包括TRAP、CALCR、CTSK、RANKL、ERK、NFATc1和c-Fos。结果:(1)Micro-CT结果:3周、6周、9周和12周的统计学结果表明,超声组的BV/TV、Tb.N和Tb.Th值高于对照组(P<0.05);超声组的Tb.Sp值低于对照组(P<0.05)。(2)荧光染色结果:每个时间点超声组的骨矿化沉积率均高于对照组(P<0.05)。(3)Von Kossa-VG染色结果:每个时间点,超声组的新生骨组织较对照组进到支架内部更为深入,骨小梁数目更多,骨小梁排列更加规则,骨小梁厚度也较大,骨质更加成熟。所有时间点超声组新生骨组织的面积百分比均大于对照组(P<0.05)。(4)PCR结果:每个时间点TRAP、CALCR、CTSK、RANKL、ERK、NFATc1和c-Fos的表达量在超声组均明显低于对照组(P<0.05)结论:(1)低强度脉冲超声波可以促进兔下颌骨多孔钛合金内骨生成。(2)低强度脉冲超声可以抑制破骨细胞标志物TRAP、CALCR和CTSK的表达,并且可以抑制破骨相关因子RANKL、ERK、c-Fos和NFATc1的表达。
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